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免费试用活动:同科生物FlashPfu 高保真DNA聚合酶

活动品牌:同科生物|FlashPfu 高保真DNA聚合酶 | 有效期:2017.07.01-2017.07.31

炎炎夏日,同科生物夏季试用推广活动清凉登场!此次活动产品为:FlashPfu DNA聚合酶,活动时间即日起至2017年7月31日止,免费送货上门,名额有限,不容错过!

产品名称FlashPfu DNA 聚合酶

英文名称FlashPfu DNA Polymerase

试用装规格:10U/管

产品描述同科FlashPfu 高保真DNA 聚合酶通过融合特殊持进能力增强因子与精心改造过的pfu DNA聚合酶,是来源于超嗜热古细菌的DNA聚合酶。该酶具有5'→3' 聚合酶活力, 3'→5' 核酸外切酶活力,并产生平头末端产物。由于其具有高效的3'→5' 核酸外切酶活力(校正活力),使得PCR能获得很好的保真性,FlashPfu DNA聚合酶的错配率约为Taq DNA聚合酶的1/50。FlashPfu DNA聚合酶的最快延伸速率可达5−6 kb/min,对于复杂模板也可达到2 kb/min。

特点与应用

1、高保真PCR——保真性为Taq DNA聚合酶的50倍

2、快速PCR——延伸速度15−30 s/kb

3、长片段PCR——基因组DNA ≤ 19 kb,λ DNA ≤ 30kb

4、生成用于平头末端克隆的PCR产物

5、定点突变

活力单位定义75°C、30分钟内使10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量,定义为1个活性单位(U)。

储存条件:储存于-20℃。

注意事项

1、请等2× FlashPfu PCR Buffer (with Mg2+)完全溶解后再配制PCR反应体系。

2、为了获得的扩增效果,扩增前的所有操作请在冰上进行。在室温下,聚合酶活力可能会产生非特异性扩增。并且请将FlashPfu DNA Polymerase最后加入反应体系,以避免酶的3’→5’核酸外切酶活力导致引物降解。

3、本产品扩增产物的克隆请按照平头末端克隆方法操作。

4、引物设计:

1)引物Tm值计算请使用最邻近法。请不要使用其他计算方法,它们计算得到的Tm值偏低,不适合本产品。

2)引物长度控制在20−35碱基,并且Tm > 60°C。

3)引物的GC含量尽量控制在40−60%。

4)在引物3’端以G或C结尾,可提高引物和模板结合效率。但是要避免3’端避免有多个G或C,防止非特异性结合。

5)正、反引物的Tm之差不要大于5°C。

6)正、反向引物的3’端避免相互互补。

7)扩增长片段时,引物长度控制在25−35碱基。

8)进行定点突变时,请将错配碱基靠近5’端。若错配碱基靠近3’端,可能会受本酶校正。

不要使用含有尿嘧啶和次黄嘌呤核苷的引物。

应用举例:对于复杂模板的极限延伸速度

步骤1. 按下表所示,在50 μl PCR体系中加入100 ng人基因组:

成分

体积

终浓度

2× FlashPfu PCR Buffer (with Mg2+)

25 μl

2.5 mM dNTP

4 μl

0.2 mM each

10 μM Forward Primer

2.5

0.5 μM

10 μM Reverse Primer

2.5

0.5 μM

FlashPfu DNA Polymerase

1.0 μl

1 U

Nuclease-free water

To 50 μl

100 ng/μl human genomic DNA

1 μl

100 ng/50 μl

步骤2. 设置PCR程序:

2步法

步骤

温度

时间

循环

预变性

98°C

3 min

1

变性

98°C

10 sec

30

延伸

72°C

X min

延伸时间:

X= 1 min (10 s/kb)

1.5 min (15 s/kb)

2 min (20 s/kb)

3 min (30 s/kb)

该案例中所用的引物:

6 kb β-globin target

FP: ACAAGGGCTACTGGTTGCCGATTTTTATTG

RP: GGGACTGGCCTCAGAGGAAACTTCAGG

案例结果电泳图:

免费试用活动:同科生物FlashPfu 高保真DNA聚合酶

免费试用说明:

试用申请时间:即日起-2017.08.31

1.运费:申请机构(单位)无需承担试用装的运输费用

2.发货时间:申请审核通过后,协商发货时间;

3.申请要求:申请实验室有相应实验,能够近期开展实验;

4.其它说明:请提供试用报告,谢谢配合!

更多的产品信息请查看:http://www.toneker.com/Data/View/1918



靠谱
以上活动最终解释权归 上海同科生物科技有限公司 所有

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电话:021-65985589
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Email:

日期 数量
2017-9 44
2017-10 9
2017-11 5
2017-12 6
2018-1 0
2018-2 0

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