量子点制备及诊断应用

  • 来源:瑞普利金(上海)生物科技有限公司
  • 时间: 2017/9/1
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    量子点(Quantum Dots, QDs)是一种能够接受激发光产生荧光的半导体纳米微晶体,其颗粒直径一般约为1-100nm。由于其具有独特的量子尺寸效应和表面效应,表现出优良的光谱特征和光化学稳定性,已经被用于生物学领域,如活细胞荧光标记及组织光学成像、肿瘤细胞示踪及检测、免疫荧光分析等。

    量子点合成

    在典型程序中,将300mg煤浸入60ml浓硫酸和20ml**中,然后杯式超声2h。反应液100或120℃油浴搅拌加热24h。溶液冷却至室温后,倒入含有100ml冰的烧杯中,滴加NaOH,直至pH为7。中性混合液用0.45um 聚四氟乙烯膜过滤后,滤液在1,000D 透析袋中透析5天。需要大规模制备时,可使用Spectrum LabsKrosFlo Research IIi 切向流超滤系统,配合3kD膜组件,将时间缩短至1-2h。纯化后的溶液通过旋转蒸发浓缩,获得固体GQD。

    量子点生物偶联

    QD偶联至生物分子可使用非共价生物素-亲和素结合法,通过配体或融合蛋白,进行基于静电作用的IgG抗体偶联。配体蛋白有一个带正电荷的亮氨酸拉链结构域,可静电结合至QD,蛋白G结构域用于结合至抗体Fc结构域。使用这种“生物功能性”受体,抗体的Fc端可结合至QD表面,且靶点特异性的F(ab')2结构域面向外侧。

    QB-抗体(QB-Ab)生物偶联


    使用量子点快速检测活性肺结核

    肺结核(TB)是结核分枝杆菌通过空气传播引起的动物传染病,可感染牛和人。据世卫组织最近的一份报导显示,全球每年约有9百多万人感染肺结核,超过3百万人没有得到所需的基础护理,造成超过1百万人死亡。

    肺结核的诊断在过去十年经历了重大的变革,但是定点照护(POC)疾病诊断仍有诸多挑战,包括成本、检测时间、设备的便携性以及性能。目前的检测方法包括:γ-干扰素释放分析、结核菌素皮肤测试、涂片显微镜检以Xpert MTB/RIF分析。

    而根据临床研究,在体内有活性结核的患者血清中,C-反应蛋白(CRP)含量会增加。所以我们开发了一种“聪明”、可调的荧光感应系统,通过可被量子点检测的生物标记物(CRP)的偶联,快速、经济地检测患者血清中的结核。用于multiplexing和IHC的生物偶联量子点制备参见原文。

    原文:C.Igweh, P.Patra,A.Petryk, Rapid Detection of Active Tuberculosis Using Coal-Derived Quantum Dots. 2017.

    KrosFlo Research 2i 切向流超滤(KR2i TFF)系统及MicroKros 中空纤维过滤组件

     

     

     


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