BrdU 细胞增殖检测试剂

来源: 西安百萤生物科技有限公司   2018-10-8   访问量:1069评论(0)

基本信息

货号:1703025 mg

储存方式:-20℃避光

结构式:

分子量:307.09

外观:白色

储存:DMSO

生物应用

5--2-脱氧尿苷(BrdU)是胸苷的类似物,可以掺入新合成的复制细胞DNAS期细胞)中。 BrdU通常用于检测活组织中的增殖细胞。 它通过在DNA复制过程中取代胸苷并将其自身整合到新合成的DNA中(在S期期间)起作用。 然后可以使用对BrdU特异的抗体来检测掺入的化学物质,从而指示活跃地复制其DNA的细胞。 因为BrdU可以在细胞分裂的S期中替代胸苷,它可以引起突变。

染色细胞样本分析

以下程序适用于大多数细胞类型。生长培养基,细胞密度,其他细胞类型的存在和其他因素可能影响Brdu掺入。

1)。 制备1-10mM DMSO储备溶液。 如果储存在-20°CDMSO储备溶液可以使用6个月。

2)。 通过离心沉淀细胞并将细胞重悬于完全生长的培养基中。 培养物中的贴壁细胞可以在盖玻片上或细胞培养孔中原位染色。

3)。 使用520μM之间的浓度添加Brdu染色,并将其孵育60分钟至过夜。 最佳孵育时间取决于细胞类型和实验目标。

4)。 用70-80%酒精或酸 - 乙醇固定细胞20-30分钟。

5)。用PBS洗涤(3次,每次2分钟)。

6)。 继续进行免疫细胞化学染色。

参考文献

1. Zeng Y, Wang Y. (2006) Sequence-dependent formation of intrastrand crosslink products from the UVB irradiation of duplex DNA containing a 5-bromo-2'-deoxyuridine or 5- bromo-2'-deoxycytidine. Nucleic Acids Res.

2. Kuwagata M, Ogawa T, Nagata T, Shioda S. (2006) The evaluation of early embryonic neurogenesis after exposure to the genotoxic agent 5-bromo-2'-deoxyuridine in mice. Neurotoxicology.

3. Sahambi SK, Hales BF. (2006) Exposure to 5-bromo-2'-deoxyuridine induces oxidative stress and activator protein-1 DNA binding activity in the embryo. Birth Defects Res A Clin Mol Teratol, 76, 580.



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