Protein A 高流速4B琼脂糖微球-蛋白纯化-试剂-生物在线
Protein A 高流速4B琼脂糖微球

Protein A 高流速4B琼脂糖微球

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产品名称: Protein A 高流速4B琼脂糖微球

英文名称: Protein A Bio-sep 4FF

产品编号: 15-1232-03

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产品产地: 西安

品牌商标: Bio-Sep

更新时间: null

使用范围: null

西安保赛恒成生物工程有限公司
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Protein A高流速琼脂糖微球亲和介质(Protein A Bio-sep 4FF)产品说明书
1. 产品简介
Protein A能特异性地与抗体的Fc区结合,所以Protein A亲和介质可用于抗体(单抗和多抗)的分离纯化,经过一步亲和层析,即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体。Protein A Bio-sep 4FF亲和介质以自制的琼脂糖凝胶为基质,以重组Protein A为配基,具有很高的物理化学稳定性,配基不易脱落,寿命长,使用方便,应用广泛。

2. 产品特性 

基质 4%交联琼脂糖凝胶
配基 r-Protein A 形状 球形介质平均粒径 90 μm (45-165) 配基密度 6mg Protein A/ml wet gel 动态载量 45-50mg h-IgG/ml wet gel
最高流速(25℃) 450 cm/h 推荐流速 <150 cm/h 最高耐压 0.3 MPa (3 bar)
pH稳定性 3~10(长时间);2~11(短时间) 
保存
4~8 oC(20%乙醇)

3. 使用方法
Protein A Bio-sep 4FF广泛用于各种抗体的分离纯化。层析操作通常包括装柱、平衡、进料、淋洗、洗脱、再生等步骤。
平衡:用5~10CV的平衡缓冲液(20 mM PB+0.15M NaCl,pH 7.0,添加适当浓度的NaCl抑制非特异性吸附)平衡层析柱,至流出液电导和pH不变(与平衡液一致)。
  进料:样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。固体样品可用平衡液溶解配制;低浓度样品溶液可用平衡液透析;高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱,样品应经离心或微滤(0.45μm)处理。进料量根据介质的载量和料液中目标蛋白的含量计算。
  淋洗:上样完毕后继续用平衡缓冲液淋洗至基线。洗脱:用洗脱缓冲液(20 mM柠檬酸,pH 3.0-4.0;或0.1M甘氨酸,pH 3.0;或20 mM乙酸钠,pH 3.0-4.0;具体洗脱条件与抗体的结合强度和稳定性密切相关,效果不好时应进行洗脱缓冲液(种类和pH或添加剂)的优化)洗脱,收集流出液。洗脱后,应立刻用碱性缓冲液(如1M Tris/HCl, pH 9.0)将收集到的抗体溶液中和到抗体稳定的pH,避免抗体失活,维持抗体的生物活性。
  再生、原位清洗:介质使用数次(5-10次,具体次数与原料的种类和来源及实验要求有关)后,需要对介质进行再生、在位清洗。
(1)用0.1M的乙酸或0.1M的乙酸/20%乙醇淋洗柱子3-5CV,然后用缓冲液洗到中性即可重复使用;
(2)也可用0.05M NaOH+1M NaCl或6M盐酸胍淋洗柱子3-5CV,并用3~10 CV的纯水冲洗,然后用缓冲液洗到中性即可重复使用。
  其它注意事项:在装柱、使用和保存柱子的时候,要避免柱子流干,气泡进入。