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人乳腺癌的诱导细胞株MCF7/ADR

人乳腺癌的诱导细胞株MCF7/ADR

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产品名称: 人乳腺癌的诱导细胞株MCF7/ADR

英文名称:

产品编号: C0027

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产品产地: 深圳

品牌商标: 百恩维

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百恩维生物科技有限公司
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人乳腺癌的诱导细胞株MCF7/ADR

细胞描述:   

动物免疫,与膜提取物富含分从任一两个人的乳腺肿瘤转移到肝脏(METMet2)。

脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞进行融合。

MCF7/ADR细胞增殖能力取决于细胞取材、培养技术、培养条件等综合因素。请按照正确的培养方法来解冻、传代,以此保证细胞具备良好的增殖能力,方便您的后继研究顺利进行。

货号

规格

培养基

运输

保存

C0027

1×106/

DMEM+10% FBS

干冰运输

液氮保存


质量控制:   
本细胞经过了检测,不含有细菌、真菌、病毒(HIVHBVHCV)、支原体。 

 

培养条件
375% CO2PH7.2~7.4无菌恒温培养


用途:   
本产品只提供给进一步的科研使用,不可应用于治疗等其他方面。

 

细胞相关操作(注意:细胞操作都需严格按照无菌操作)

收到复苏好的贴壁细胞的处理方法:
1. 先从外包装盒拿出细胞瓶,在细胞瓶表面喷一层酒精,并小心去掉封口膜;
2. 在显微镜下观察细胞状态,并确定是否染菌,如有染菌,请立即拍照,并将细胞丢掉;
3将培养瓶置于37°C5% CO2的无菌培养箱中培养4-6小时;
4倒掉多余的培养基,留正常体积的培养基;
5重新将培养瓶置于37°C5% CO2的无菌培养箱中培养过夜;
6第二天传代。

 

收到冻存细胞的处理方法:

1.37°C水浴预热培养基
2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻(解冻后不要继续暖细胞)
3.在超净台中加入5ml培养基重悬细胞,1000rpm离心5min
4.弃上清加入5ml培养基重悬细胞后转入T25培养瓶中轻轻晃匀
5.置于37°C5% CO2培养箱中培养(培养瓶盖没有透气孔的话瓶盖不要拧太紧)

6.第二天用新鲜的培养基给细胞换液后继续培养。

 

细胞传代

1.当细胞融合度达到90%以上时,给细胞传代

2.37°C水浴预热培养基

3.在超净台中,培养基,加入2-5mlPBS清洗细胞后,再加入1ml胰酶消化细胞

4.显微镜下观察到细胞变圆,有细胞开始脱离瓶壁时,加入5ml培养基终止消化

5.用移液器轻轻吹下瓶壁上剩余的细胞,并轻轻吹打将细胞吹散;

6.将细胞移入离心管中,1000rpm离心5min

7.弃上清加入15-20ml的培养基重悬细胞后转入T75培养瓶中或按适当比例传到T25瓶中(确保细胞贴壁后融合度在25-50%之间),细胞密度在1×104 cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25瓶),混细胞悬液,确保细胞均匀分布

8.将培养瓶置于37°C5% CO2的无菌培养箱中培养

 

细胞冻存

1.37°C水浴预热培养基

2.消化细胞后给细胞计数

1)洗净晾干血小板计数板和盖玻片将盖玻片完全覆盖计数区

2)充分混匀细胞取少量(0.1-0.5ml)细胞悬液与等体积的染色液台盼蓝混合移液器吹吸混合均匀用移液器取20ul混合液从盖玻片两端(与中间凹槽平行的两端)分别打入细胞以细胞悬液刚好浸湿盖玻片为佳

3)显微镜下数四个计数区的总细胞数无活性细胞染成蓝色活细胞不被染色

4)细胞密度=细胞总数/4×10000×2

这里10000是不变的因为计数的细胞是在体积为1mm×1mm×0.1mm10-4cm3计数池内1cm3=1ml将四个计数区的细胞数除以4取平均数2是补偿加等体积台盼蓝形成的稀释。

5)细胞活性=活细胞数/细胞总数×100%

:细胞密度高时可调整细胞悬液和台盼蓝的比例计数时乘以相应的稀释倍数即可

3.当细胞密度达到传代密度且细胞活性在90%以上时可以冻存细胞

4.在超净台中将要冻存的细胞移入离心管1000rpm离心5min

5.弃上清90%培养液+10%DMSO的混合液重悬细胞并调整细胞密度为1-3×106/ml

6.将细胞悬液分装到冻存管中(1-1.5ml/)

7.将装有细胞的冻存管放入程序降温冻存盒-20°C1-2h-80°C过夜然后快速转移到液氮中