产品简介：rTEV蛋白酶(重组型)是经过基因工程改造后的重组蛋白

酶，该酶特异性识别Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe- Gln^Gly七氨基酸

序列。rTEV蛋白酶与肠激酶(EK)、Thrombin、Factor Xa、SUMO

等蛋白酶相比，具有高活性、特异性高的双重特点，rTEV蛋白酶

因具有高剪切活性和特异性，已成为融合蛋白表达后去除融合tag

的首选蛋白酶。该酶经6×His标签纯化而得(含组氨酸标签)，纯

度达99％，剪切反应完毕后可通过Ni-NTA Resin(Cat.No.P2010,

Solarbio)去除。该酶在温度2-30℃，pH6.0-8.5反应条件下均具

有活性(见下表)。

不同温度下剪切活性(%)

            4℃ 16℃ 21℃ 30℃

0.5 h    34 58 56 70

1 h       58 80 78 90

2 h       71 99 99 99

4 h       84 99 99 99

组分与保存条件:

组分名称                                    数量                      保存

rTEV 蛋白酶 (10 U/μl)             100μl                -70℃/-20℃

20XrTEV Buffer                        1 ml                      -20℃

活性定义:在1XrTEV Buffer(50 mM Tris-HCl，pH8.0, 0.5 mM

EDTA, 1mM DTT)，30℃反应1h，剪切>85％的3 μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。

保存条件:-70℃，可储存至少1年，-20℃，可储存至少6个月，

避免反复冻融。

 使用方法说明：

1. 推荐使用溶液：50 mM NaH2PO4, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM DTT, 10%甘油，pH 8.0 buffer中进行剪切。

2. 250×rTEV Protease Buffer：250mM EDTA, 250 mM DTT, PH 8.0

3. rTEV 蛋白酶与需要酶切的目的蛋白比例：1：100

4. 酶切体系：

融合蛋白 1000 μg

250×rTEV Protease Buffer 4μL

rTEV 蛋白酶 2μL

定容至 1000μL

定容缓冲液：50 mM NaH2PO4, 150mM NaCl

5. 酶切条件：在 16℃酶切 6hr。用户可以根据自己研究的目的蛋白进行摸索酶切条件，可适当加大酶量或延长酶切时间。

6. 可取少量样本进行 SDS-PAGE 分析，若要去除酶切后体系中的 rTEV 蛋白酶，可用 His 标签纯化树脂亲和层析。