粪便基因组DNA提取试剂盒
货号：D2700
规格：50T/ 100T
保存：室温(15℃-25℃) 干燥保存，复检期12个月，2℃-8℃保存时间更长。
试剂盒内容：
D2700-50T
D2700-100T
溶液A
25ml
50ml
溶液B
3ml
6ml
溶液C
5ml
10ml
溶液D
10ml
20ml
漂洗液
15ml
15ml×2
洗脱液
10ml
20ml
吸附柱
50个
100个
收集管
50个
100个
说明书
1份
1份
注：试剂盒开封后溶液A、B、C、D需在2-8℃保存。
产品简介:
本试剂盒适合于从各种粪便中提取微生物DNA。对粪便中各种细菌、真菌有很好裂解效果，最大限度的保留了微生物DNA的多态性。
使用本试剂盒提取的DNA产量大、完整性好，可直接用于各种常规操作，包括酶切、PCR 、文库构建、Southern 杂交等实验。
操作步骤： 使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1、称取粪便样本0.1-0.5g，在液氮中充分研磨成细粉末，加入450ul 溶液A 震荡混匀。
* 也可直接称取样本 0.1-0.5g 于离心管(建议使用 2ml 圆底管)，加入 450ul 溶液 A 剧烈震荡混匀1-2min 至没有固体块。使用液氮研磨效果最佳。
2、加入50ul 溶液B 充分颠倒混匀( 不要剧烈震荡)，65℃水浴6min，每2min充分颠倒混匀一次。
3、加入100ul 溶液C 充分颠倒混匀( 不要剧烈震荡)，12000 rpm离心10min 。
4、将上清转移到新的离心管，12000rpm离心2min 。
5、在吸附柱中加入200ul 溶液D ，将离心后的上清加入到带有溶液D 的吸附柱中，用移液器吹吸几次混匀，12000 rpm离心1min。
6、将收集管中的滤出液混匀后重新吸入吸附柱( 必须)，12000 rpm离心1min。
7、倒掉收集管中的废液，在吸附柱中加入漂洗液500ul，12000 rpm离心1min。
8、倒掉收集管中的废液，重复步骤7 两次(共漂洗三次)。
9、倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管，12000 rpm离心2min 。
10、拿出吸附柱在室温干燥数分钟( 因季节及气候等因素不等)，或50℃干燥1min。
11、将吸附柱放入一个新的离心管中，加入50-100ul 洗脱液(65 ℃预热)，12000 rpm离心1min。
12、将离心管中的液体重新加入到吸附柱中，12000 rpm离心1min。离心管中即为粪便微生物DNA 溶液。
注意事项:
1、新鲜的粪便样本会得到更高的产率，不同样本在采样前应先查阅相应的最佳保存条件。
2、若溶液中出现浑浊可在37℃水浴中溶解片刻至清澈，不会影响结果。
3、在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀，否则会堵塞吸附柱，并影响产物纯度。
4、洗脱缓冲液的体积最好不少于50ul ，体积过小会影响回收效率；建议使用试剂盒附带的洗脱缓冲液，用水洗脱也会损失部分产物；DNA应保存在-20 ℃避免反复冻融，以防降解。
5、液体试剂避免接触皮肤，若意外接触应立即使用大量清水冲洗。
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