L3799载体构建的基本实验步骤包括（1）目的DNA片段和载体的制备；(2)目的DNA片段和载体的连接；(3)连接产物的转化；(4)克隆筛选。

技术流程如下：

1、miRNAs序列分析；

2、PCR引物设计及合成；

3、PCR扩增pri-miRNA序列或者单链互补引物退火形成pre-miRNA序列；

4、将片段克隆至含有CMV强启动子的载体上；

5、L3799测序以确保插入序列正确性；

6、向客户提交测序结果与实验方法报告单。

基因过表达载体构建

基因过表达指细胞利用自身元件把储存在表达质粒DNA中的遗传信息转录、翻译成具有生物活性的蛋白质分子的过程，基因过表达是目前研究基因功能最常用的手段。

L3799可以提供以PCR为基础的各类载体构建，如细菌表达载体、酵母表达载体、动物表达载体，报告基因载体等。

●多顺反子表达(multi-cistron expression)： 通过2A、IRES、多启动子、融合表达等手段，在一个质粒里实现同时表达两个或者两个以上基因。

●上百种工具载体可选，满足不同研究需要：包括各种原核、真核表达载体、以及各种病毒载体。

●多种报告基因示踪： 绿色荧光蛋白：GFP、eGFP、emGFP、ZsGreen1、hrGFP，红色荧光蛋白：mcherry、DsRed-Express2、tdTomato，此外还有YFP等。

●可选择各种启动子： CMV、mCMV、EF1a、PGK、SV40、UBC，CAG以及各种组织特异性启动子。

●L3799多种亲和标签融合：His、flag、GST、c-myc、HA、MBP等等。XY100844PCR优化试剂盒1套XY90302氯化锰溶液，PCR级5mLXY70905明胶溶液，2%，PCR级1.5mLXY61203高GC DNA清除剂，PCR级1.5mLXY130307二氯化锰溶液，25mM，PCR级5mLXY130840硫酸镁溶液，10mM，PCR级5mLXY130841石蜡油，PCR级10mLXY80205DMSO，PCR级1.5mLXY130506海藻糖溶液，1.5M，PCR级1.5mLXY70902甜菜碱溶液，5M，PCR级1.5mLXY70909绿如蓝染料，PCR级0.1mL|1mLXY51208dNTP溶液，10 mM0.5mL(B)|5mL(B)XY131038dUTP溶液，100 mM0.4mLXY130920dITP溶液，100mM0.5mLXY120615dATP溶液，100mM0.5mLXY120617dTTP溶液，100mM0.5mLXY120619dGTP溶液，100mM0.5mLXY130917dCTP溶液，100mM0.5mLXY131139Deaza dGTP溶液，5mM0.4mLXY131140双脱氧dNTP溶液，10mM40uL×4XY131141dNTP和引物清除剂100次XY131212PCR Mix染料10mLXY60901可逆型Taq DNA聚合酶抑制剂0.3mLXY130815Taq酶抗体250U|1000UXY130601DNA 修复混合液30次|150次XY70802即用型PCR试剂盒2.0100次|600次XY90805即用型PCR试剂盒3.0100次|600次XY130986即用型热启动PCR 试剂盒1.5次XY130985免DNA提取PCR试剂盒100次XY101005即用型易错PCR试剂盒100次XY90702即用型长片段PCR试剂盒20次XY90708即用型高保真PCR试剂盒1.5mL|9mLXY130605即用型多重 PCR试剂盒50次XY90408即用型荧光定量PCR试剂盒100次|600次XY130816Real-Time PCR稀释液1mlXY130817ROX参考染料，高浓度型200μlXY100931ROX参考染料，低浓度型5μgXY60906cDNA第一链合成试剂盒10次|50次XY130911miRNA cDNA第一链合成试剂盒25次XY131042miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒25次XY131005cDNA第二链合成试剂盒30次XY130308一管式双链cDNA合成试剂盒10次XY100814Oligo dT12-18引物5μgXY1004096 nt随机引物5μgXY13122710 nt随机引物5μgXY1206796nt随机引物(抗水解)100μLXY80206两管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq)50次XY91202双酶一管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq)50次XY130609一步式RT-PCR Mix1mLXY130957免RNA提取RT-PCR试剂盒100次XY101219即用型荧光定量RT-PCR试剂盒50次XY100941通用型全基因组扩增试剂盒30次XY100938单细胞全基因组扩增试剂盒30次XY100940石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒30次XY100942单孢子全基因组扩增试剂盒30次XY100947环状DNA全基因组扩增试剂盒30次XY100203通用型LAMP试剂盒50次XY101114通用型RT-LAMP试剂盒50次XY130923LAMP扩增阳性对照50次XY130833LAMP可见光染料1mLXY131179核酸稀释液，测OD专用100mLXY131083Ribo-SPIA cDNA 扩增试剂盒20次XY91106T7体外转录试剂盒50次(A)|50次(B)XY91107SP6体外转录试剂盒50次(A)|50次(B)XY91108T3体外转录试剂盒50次(A)|50次(B)XY130694m7G(5′)ppp(5′)G 帽结构类似物25ODXY130695m7G(5′)ppp(5′)A 帽结构类似物25ODXY130696G(5′)ppp(5′)A 帽结构类似物25ODXY130697G(5′)ppp(5′)G 帽结构类似物25ODXY1306983′-O-Me-m7G(5′)ppp(5′)G 帽结构类似物25ODXY70906NTP溶液，10 mM0.5mLXY120625ATP溶液，100mM0.25mLXY120626UTP溶液，100mM0.25mLXY120628GTP溶液，100mM0.25mLXY120627CTP溶液，100mM0.25mLXY130832通用型MLPA试剂盒20次XY130551单细胞RNA扩增试剂盒80次XY130803单细胞裂解液(DNA)1mLXY130804单细胞裂解液(RNA)1mLXY130805单细胞悬浮液1mLXY130806胚胎裂解液1mLXY131128动物种属鉴定PCR Mix100次XY131129植物种属鉴定PCR Mix100次XY131130真菌种属鉴定PCR Mix100次XY131131细菌种属鉴定PCR Mix100次XY30常用PCR引物100uL

基因结构和功能

XY100212 一管式点突变试剂盒 10次

XY130823 多点突变试剂盒 20次