Mtchi4基因工程的基本操作程序：

1、目的基因的获取

（1）目的基因是指： 编码蛋白质的结构基因。

（2）获取方法：①从基因文库中获取；②人工合成（反转录法和化学合成法）；③PCR技术扩增目的基因。

2、基因表达载体的构建

（1）Mtchi4目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。

（2）组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。

(1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DN**段之间连接形成的产物有目的基因和载体连接物、载体和载体连接物、目的基因和目的基因连接物三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行分离、纯化(或筛选)。

(2)Mtchi4用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是载体和载体连接物；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物有目的基因和载体连接物、载体和载体连接物。

(3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是，其合成的产物是启动子mRNA。

(4)Mtchi4在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是_EcoRⅠ和BamHⅠ。XY8130514 硅基磁珠 2mL

XY8130515 氨基磁珠 2mL

XY8130516 羧基磁珠 2mL

XY8130517 环氧基磁珠 2mL

XY8130518 醛基磁珠 2mL

XY8130519 巯基磁珠 2mL

XY8130520 壳聚糖磁珠 2mL

XY8130513 无包被磁珠 2mL

DNA提取|RNA提取

XY0101 TRIpure Reagent 总RNA提取试剂 50ml/100ml

XY0201 TRIpure LS Reagent 液体样本RNA提取试剂 50ml/100ml

XY2501 RNAblood 超纯全血总RNA快速提取试剂盒 20次/50次

XY2301 RNAliquid 超速全血(液体样本)总RNA提取试剂盒 20次/50次

XY0301 RNApure 超纯总RNA快速提取试剂盒 20次/50次

XY3301 PLANTpure 通用植物总RNA快速提取试剂盒 20次/50次

XY0601 EASYspin 全血RNA快速提取试剂盒 20次/50次

XY0701 EASYspin 组织/细胞RNA快速提取试剂盒 20次/50次

XY2801 EASYspin Plus 组织/细胞RNA快速提取试剂盒 (不需DNA酶消化) 20次/50次

XY3901 EASYspin Plus 微量样品RNA快速提取试剂盒 (不需DNA酶消化) 50次

XY2901 Allprep 组织/细胞RNA/DNA分提试剂盒 (不需DNA酶消化) 20次/50次

XY3601 Allprep 组织/细胞RNA/DNA/Protein分提试剂盒 (不需DNA酶消化) 20次/50次

XY0801 EASYspin 细菌RNA快速提取试剂盒 20次/50次

XY4301 EASYspin Plus 细菌RNA快速提取试剂盒 20次/50次

XY0901 EASYspin 植物RNA快速提取试剂盒 20次/50次

XY3801 EASYspin Plus 植物RNA快速提取试剂盒 (不需DNA酶消化) 20次/50次

XY1001 EASYspin 酵母RNA快速提取试剂盒 50次