pAL4-载体及构建-试剂-生物在线
pAL4

pAL4

商家询价

产品名称: pAL4

英文名称: pAL4

产品编号: 1760

产品价格: 0

产品产地: 中国

品牌商标: TIANDZ

更新时间: 2023-08-17T09:55:27

使用范围: null

上海信裕生物科技有限公司
  • 联系人 : 徐经理
  • 地址 : 上海市闵行莘庄工业区春东路508号A1-2F
  • 邮编 : 200612
  • 所在区域 : 上海
  • 电话 : 152****8802
  • 传真 : 021-37680378
  • 邮箱 : shxysw02@163.com

  

pAL4基因工程的基本操作程序:

1、目的基因的获取

1)目的基因是指: 编码蛋白质的结构基因。

2)获取方法:①从基因文库中获取;②人工合成(反转录法和化学合成法);③PCR技术扩增目的基因。

2、基因表达载体的构建

1)pAL4目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。

2)组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因。

(1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切,酶切产物用DNA连接酶进行连接后,其中由两个DN**段之间连接形成的产物有目的基因和载体连接物、载体和载体连接物、目的基因和目的基因连接物三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒,需要对这些连接产物进行分离、纯化(或筛选)。

(2)pAL4用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是载体和载体连接物;若接种到含青霉素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物有目的基因和载体连接物、载体和载体连接物。

(3)目的基因表达时,RNA聚合酶识别和结合的位点是,其合成的产物是启动子mRNA。

(4)pAL4在上述实验中,为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶是_EcoRⅠ和BamHⅠ。XY880923 大提柱式动物DNAOUT 4次

XY8101111 柱式软体动物DNAOUT 50次

XY881101 柱式昆虫DNAOUT 50次

XY83671 血液DNAOUT 50次|150次

XY860306 柱式血液DNAOUT 50次|200次

XY8130509 磁珠血液DNAOUT 100次

XY8120522 柱式血液DNA-RNAOUT 50次

XY8120202 血液保存和DNA纯化套装 100次

XY880924 大提柱式血液DNAOUT 4次

XY880920 96孔板血液DNAOUT(离心法) 1次|5次

XY871002 凝固血液DNAOUT 30次|100次

XY871204 柱式凝固血液DNAOUT 50次

XY8120720 柱式冻存血液DNAOUT 50次|250次

XY880805 柱式毛发DNAOUT 50次

XY8111201 痰液DNAOUT 50次

XY891102 柱式骨骼DNAOUT 50次

XY880801 柱式拭子DNAOUT 50次

XY860501 一管式拭子DNAOUT 20次|100次

XY870502 石蜡包埋组织DNAOUT 30次

XY870601 粪便DNAOUT 30次|100次

XY880102 柱式粪便DNAOUT 50次

XY8130812 凋亡DNAOUT 24次

XY880602 柱式凋亡DNAOUT 50次

XY890314 柱式尿液DNAOUT 50次

XY8121102 柱式鼠尾DNAOUT 50次