pBPV-BV1-载体及构建-试剂-生物在线
pBPV-BV1

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产品名称: pBPV-BV1

英文名称: pBPV-BV1

产品编号: 1951

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产品产地: 中国

品牌商标: TIANDZ

更新时间: 2023-08-17T09:55:27

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pBPV-BV1基因工程的基本操作程序:

1、目的基因的获取

1)目的基因是指: 编码蛋白质的结构基因。

2)获取方法:①从基因文库中获取;②人工合成(反转录法和化学合成法);③PCR技术扩增目的基因。

2、基因表达载体的构建

1)pBPV-BV1目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。

2)组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因。

(1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切,酶切产物用DNA连接酶进行连接后,其中由两个DN**段之间连接形成的产物有目的基因和载体连接物、载体和载体连接物、目的基因和目的基因连接物三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒,需要对这些连接产物进行分离、纯化(或筛选)。

(2)pBPV-BV1用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是载体和载体连接物;若接种到含青霉素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物有目的基因和载体连接物、载体和载体连接物。

(3)目的基因表达时,RNA聚合酶识别和结合的位点是,其合成的产物是启动子mRNA。

(4)pBPV-BV1在上述实验中,为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶是_EcoRⅠ和BamHⅠ。XY80807动物细胞裂解液50mL(A)|50mL(B)XY131006RIPA裂解液(强)100mLXY131007RIPA裂解液(中)100mLXY131008RIPA裂解液(弱)100mLXY131009NP-40裂解液100mLXY90707动植物总蛋白微量提取试剂盒50次XY91204动植物膜蛋白微量制备试剂盒50次XY90613动物细胞核蛋白微量制备试剂盒25次|100次XY91203一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒30次|100次XY121208液体样品蛋白纯化回收试剂盒50次XY81218植物总蛋白质微量提取试剂盒(SDS-PAGE)30次XY81219植物总蛋白质微量提取试剂(2DE)30次|100次XY81202真菌总蛋白质微量提取试剂盒50次XY90902细菌总蛋白质微量提取试剂盒30次XY100929细菌膜蛋白质微量提取试剂盒50次XY131064细胞表面蛋白分离试剂盒8次XY131066磷酸化蛋白富集试剂盒10次XY131067ConA 糖蛋白分离试剂盒10次XY131205WGA 糖蛋白分离试剂盒10次XY90508包涵体微量纯化试剂盒20次XY90509包涵体中量纯化试剂盒5次XY90510包涵体大量纯化试剂盒2次XY131121蛋白折叠试剂盒100次XY100302包涵体蛋白溶解及复性套装100次XY100102一站式His标记蛋白质微量纯化套装20次(A)|20次(B)XY100101镍柱介质2mL|10mLXY131057钴柱介质10mLXY120801镍柱原位再生试剂盒20次XY100202兔抗His标签多抗,HRP标记100μLXY111116一站式GST标记蛋白质微量纯化套装20次(A)|20次(B)XY120101谷胱甘肽琼脂糖2mLXY120705L-谷胱甘肽(还原型)5gXY120534兔抗GST标签多抗20μLXY120535HRP标记的兔抗GST标签多抗20μLXY130871一站式MBP标签蛋白纯化套装20次XY130573小鼠抗His标签单抗100μLXY130574小鼠抗Flag标签单抗100μLXY130575小鼠抗c-Myc标签单抗100μLXY130576小鼠抗HA标签单抗100μLXY130577小鼠抗GST标签单抗100μLXY130578小鼠抗V5标签单抗100μLXY130579小鼠抗MBP标签单抗100μLXY130580小鼠抗GFP标签单抗100μLXY130581小鼠抗mCherry标签单抗100μLXY130582小鼠RFP标签单抗100μLXY130583小鼠抗VSV-G标签单抗100μLXY130584小鼠抗T7标签单抗100μLXY130585小鼠抗CBP标签单抗100μLXY130586小鼠抗HSV标签单抗100μLXY130587小鼠抗E2标签单抗100μLXY130588小鼠抗S1标签单抗100μLXY130589小鼠抗Tag-100标签蛋白单抗100μLXY130590小鼠抗HPC4标签蛋白单抗100μLXY130591小鼠抗SUMO标签蛋白单抗100μLXY130592HRP标记内参抗体30μLXY131202即用型GFP标签蛋白裂解液100uLXY130413肝素琼脂糖5mL|50mLXY130417蓝胶琼脂糖5mL|50mLXY130421DEAE交换介质50mLXY130423Q交换介质50mLXY130422CM交换介质50mLXY130424SP交换介质50mLXY131020Sephacryl S-400基质10mLXY130425苯基介质50mLXY130426丁基介质50mLXY130427丁基硫介质50mLXY130418Protein A琼脂糖1mLXY130420Protein G琼脂糖1mLXY131201Protein A+G琼脂糖2mLXY100939福林酚试剂100mLXY90610卵白蛋白标准品1mLXY131070牛血清白蛋白标准品1mLXY131071牛血清γ 球蛋白标准品1mLXY131072预稀释BSA 蛋白标准品1mLXY131220预稀释BGG 蛋白标准品1mLXY131074SDS-PAGE 样品预处理试剂盒50次XY131122考马斯亮蓝R-25010gXY131123考马斯亮蓝G-25010gXY131078天然蛋白A1mgXY131079重组蛋白A1mgXY131080重组蛋白G1mgXY131081重组蛋白A/G1mgXY131082重组蛋白L1mgXY131075糖蛋白染色试剂盒10次XY131076磷酸蛋白染色试剂盒10次XY131077组氨酸标签蛋白染色试剂盒10次XY80814Bradford法蛋白定量试剂盒100mL|200mLXY80815BCA法蛋白定量试剂盒500次XY80816超敏型BCA法蛋白定量试剂盒500次XY131069还原剂兼容型BCA蛋白定量试剂盒250次XY101102改良Lowry法蛋白定量试剂盒1000次XY80808蛋白酶抑制剂混合液2×0.5mLXY80809蛋白磷酸酶抑制剂混合液11mLXY130525蛋白磷酸酶抑制剂混合液25mLXY130526细菌专用蛋白酶抑制剂10mLXY130527哺乳动物专用蛋白酶抑制剂1mLXY130528植物专用蛋白酶抑制剂1mLXY130529酵母专用蛋白酶抑制剂5mLXY130530His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂10mLXY130531组织培养专用蛋白酶抑制剂1mLXY130543α2巨球蛋白25Inh.UXY130544AEBSF溶液5mLXY130534抗凝血酶Ⅲ溶液1mLXY130535APMSF溶液1mLXY100834胰蛋白酶抑制剂溶液10mLXY130536抑氨肽酶溶液5mLXY130537钙蛋白酶抑制剂Ⅰ溶液10mLXY100538钙蛋白酶抑制剂Ⅱ溶液10mLXY100539胰凝乳蛋白酶抑制剂溶液1mLXY130540二氯异香豆素溶液10mLXY130541E-64蛋白酶抑制剂溶液10mLXY100837EDTA溶液,0.5M,蛋白级10mLXY130532EGTA溶液10mLXY130542水蛭素溶液2000ATUXY100836亮抑蛋白酶肽溶液1mLXY130533木瓜蛋白酶抑制剂溶液10mLXY100835胃蛋白酶抑制剂溶液1mLXY130545膦酰二肽溶液10mLXY100833PMSF溶液5mLXY131043CHAPS5gXY131044辛甲基β 葡糖苷1gXY131045辛甲基硫吡喃葡萄糖苷5gXY131046n-十二烷基-β-D-麦芽糖苷1gXY131047脱氧胆酸钠5gXY131048胆酸钠5gXY131049十二烷基磺酸钠100gXY131050去垢剂去除树脂10mLXY131051十二烷基磺酸钠清除剂25mLXY131052β- 巯基乙醇,蛋白级10mLXY131053蛋白级DTT5gXY131054免称量蛋白级DTT48管XY131055TCEP 盐酸膦1gXY131056TCEP 溶液5mLXY131120盐酸胍溶液200mLXY131222咪唑溶液100mLXY131058咪唑25gXY131059亚氨二乙酸介质10mLXY131061谷胱甘肽S 转移酶1mgXY81216核酸清除剂1.5mLXY81029非变性法蛋白沉淀试剂盒10次XY81217微量蛋白沉淀试剂盒50次XY61205血清白蛋白清除剂15次XY100915SDS-PAGE预制胶12块XY80810一站式SDS-PAGE电泳套装30次XY100867SDS-PAGE浓缩胶配胶液500mLXY100868SDS-PAGE分离胶配胶液500mLXY81204SDS-PAGE上样液10mLXY81203SDS-PAGE电泳液5L|20LXY100908一站式长效期SDS-PAGE电泳套装30次(A)|30次(B)XY100909长效期SDS-PAGE配胶液200mLXY100910长效期SDS-PAGE还原剂10mLXY100911长效期SDS-PAGE上样液1mLXY100912长效期SDS-PAGE电泳液(干粉)20L(A)XY81205一站式Tricine-SDS-PAGE套装30次XY81225Tricine-SDS-PAGE配胶液250mL|1000mLXY81213Tricine-SDS-PAGE上样液1mL|5mLXY81214Tricine-SDS-PAGE阳极电泳液(干粉)10L|50LXY81226Tricine-SDS-PAGE阴极电泳液(干粉)10L|50LXY81212一站式蛋白非变性PAGE套装30次(A)|30次(B)|30次(C)XY100828高pH缓冲液套装30次XY100829中pH缓冲液套装30次XY100830低pH缓冲液套装30次XY70102蛋白质电泳分子量标准15次(A)|20次(B)|10次(C)XY70704预染蛋白质电泳分子量标准10次(A)|10次(B)XY90402蛋白胶微量回收试剂盒50次XY90403蛋白胶中量回收试剂盒5次XY80812考马斯亮蓝染液250mLXY61204一步式PAGE染液10次XY111203绿如蓝蛋白染液250次XY100810超快蛋白银染试剂盒1000mLXY100811质谱兼容型蛋白银染试剂盒10次XY100603银染清除剂30次XY81215一站式Western印迹套装(显色法)20次(A)|20次(B)XY131104Western 封堵液500mLXY131105酪蛋白封堵液100mL(A)|100mL(B)XY131236牛血清白蛋白封堵液250mLXY131109Tris 缓冲盐溶液(TBS)10包XY131112氯萘酚溶液50mLXY131114ABTS 溶液50mlXY131115OPD 干粉25gXY131116pNPP 干粉1gXY131108ONPG 干粉1gXY101122尼龙膜1张XY101123PVDF膜1张XY81206氨基黑染膜液250mLXY100924丽春红S染膜液250mLXY100928湿法电转液(干粉)20LXY81207半干法电转液(干粉)20LXY100878Western印迹膜封膜液100mLXY81208印迹膜抗体稀释液100mLXY80813Western印迹膜抗体清除剂50mL|200mLXY1008315-溴-4-氯-3-吲哚磷酸100mgXY100832四氮唑蓝250mgXY81224BCIP/NBT显色试剂盒100mLXY100214预混型BCIP/NBT溶液100mLXY81223增强型DAB显色试剂盒100mLXY101106沉淀型TMB显色试剂盒100mLXY91101一管式 TMB 显色液100mL(A)XY120201超敏化学发光(HRP)检测试剂盒25mL|250mLXY131192超敏化学发光(AP)检测试剂盒25mLXY131142鲁米诺1gXY131143AMPPD100mgXY131118乙烯乙二醇200mLXY131119HRP 稳定剂/ 稀释剂200mLXY130565β-Actin小鼠单抗30μLXY130566α-Actin小鼠单抗30μLXY130567β-Tubulin小鼠单抗30μLXY130568α-Tubulin小鼠单抗30μLXY130569GAPDH小鼠单抗30μLXY130570植物Actin小鼠单抗30μLXY130571组蛋白3.1小鼠单抗30μLXY130572COX IV兔单抗20μLXY131144山羊抗小鼠IgG(H+L),碱性磷酸酶标记100μLXY131145山羊抗兔IgG(Fc),碱性磷酸酶标记100μLXY131146山羊抗人IgG(H+L),碱性磷酸酶标记100μLXY131147山羊抗大鼠IgG(H+L),碱性磷酸酶标记100μLXY131148驴抗山羊IgG,碱性磷酸酶标记60μLXY131149山羊抗兔IgG(H+L),辣根过氧化物酶标记300μLXY131150山羊抗小鼠IgG(H+L),辣根过氧化物酶标记300μLXY131151山羊抗人IgG(H+L),辣根过氧化物酶标记300μLXY131152兔抗鸡IgY,辣根过氧化物酶标记300μLXY131153驴抗山羊IgG,辣根过氧化物酶标记60μLXY131154山羊抗小鼠IgG,荧光素488标记0.1mgXY131155山羊抗小鼠IgG,荧光素555标记0.1mgXY131156山羊抗兔IgG,异硫*酸荧光素标记0.1mgXY131157藻红蛋白标记山羊抗兔IgG0.1mgXY131158荧光素488标记山羊抗兔IgG0.1mgXY131159荧光素555标记山羊抗兔IgG0.1mgXY131160异硫*酸荧光素标记山羊抗小鼠IgG0.1mgXY131161山羊抗小鼠IgG,藻红蛋白标记0.1mgXY100841β-巯基乙醇1.5mLXY100881SDS溶液(10%,电泳级)100mLXY90311电泳级Tricine干粉100gXY111007MALDI蛋白样品处理试剂盒500次

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