pCMV-Cypridina Luc基因工程的基本操作程序：

1、目的基因的获取

（1）目的基因是指： 编码蛋白质的结构基因。

（2）获取方法：①从基因文库中获取；②人工合成（反转录法和化学合成法）；③PCR技术扩增目的基因。

2、基因表达载体的构建

（1）pCMV-Cypridina Luc目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。

（2）组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。

(1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DN**段之间连接形成的产物有目的基因和载体连接物、载体和载体连接物、目的基因和目的基因连接物三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行分离、纯化(或筛选)。

(2)pCMV-Cypridina Luc用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是载体和载体连接物；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物有目的基因和载体连接物、载体和载体连接物。

(3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是，其合成的产物是启动子mRNA。

(4)pCMV-Cypridina Luc在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是_EcoRⅠ和BamHⅠ。XY002 猪蓝耳凝胶PCR试剂盒 PRRSV 10/40次

XY003 口蹄疫凝胶PCR试剂盒 FMDV 10/40次

XY001结核杆菌荧光定量PCR检测试剂盒 TB40/96次XY002牛病毒性腹泻/粘膜病病毒荧光定量PCR检测试剂盒 BVDV40/96次XY003牛传染性鼻气管炎病毒荧光定量PCR检测试剂盒 IBRV40/96次XY004布鲁氏菌荧光定量PCR检测试剂盒 BS40次/盒XY005炭疽杆菌荧光定量PCR检测试剂盒 BA40次/盒XY006口蹄疫通用型荧光定量PCR检测试剂盒 FMDV40次/盒XY007口蹄疫A型荧光定量PCR检测试剂盒 FMDV-A40次/盒XY008口蹄疫O型荧光定量PCR检测试剂盒 FMDV-O40次/盒XY009口蹄疫亚I型荧光定量PCR检测试剂盒 FMDV-I40次/盒XY010副结核荧光定量PCR检测试剂盒 paratuberculo sis40次/盒XY001禽流感病毒(即A型禽流感)通用型荧光定量PCR检测试剂盒 AIV-M40/96次XY002禽流感病毒H5亚型荧光定量PCR检测试剂盒 AIV-H540/96次XY003禽流感病毒N1亚型荧光定量PCR检测试剂盒 AIV-N140/96次XY004禽流感病毒H7亚型荧光定量PCR检测试剂盒 AIV-H740/96次XY004-1禽流感病毒H7N9荧光定量PCR检测试剂盒 AIV-H7N924/40次XY005禽流感病毒H9亚型荧光定量PCR检测试剂盒 AIV-H940/96次XY006新城疫病毒通用型荧光定量PCR检测试剂盒 NDV40/96次XY007新城疫病毒(中强毒株)荧光定量PCR检测试剂盒 NDV-vm40/96次XY008禽传染性法氏囊病病毒荧光定量PCR检测试剂盒 IBDV40/96次XY009禽传染性支气管炎病毒荧光定量PCR检测试剂盒 IBV40/96次XY010禽马立克氏病病毒荧光定量PCR检测试剂盒 MDV40/96次XY011禽J亚型禽白血病病毒荧光定量PCR检测试剂盒 ALV－J40/96次XY012禽网状内皮组织增殖病病毒荧光定量PCR检测试剂盒 REV48次/盒XY013禽流感通用型和新城疫病毒通用型(二合一)荧光定量PCR检测试剂盒 AIV-M和NDV48次/盒XY001鲤春病毒血症荧光定量PCR检测试剂盒 Rhabdovirus carpio40次/盒XY002传染性胰脏坏死病毒荧光定量PCR检测试剂盒 IPNV40次/盒XY003病毒性出血性败血症荧光定量PCR检测试剂盒 VHS40次/盒XY004对虾白斑病毒荧光定量PCR检测试剂盒 WSSV40次/盒XY001猪瘟病毒荧光定量PCR检测试剂盒 CSFV40/96次XY002猪瘟野毒病毒荧光定量PCR检测试剂盒 CSFV-UTR40/96次XY003口蹄疫病毒荧光定量PCR检测试剂盒 FMDV40/96次XY004猪蓝耳病病毒荧光定量PCR检测试剂盒 PRRSV40/96次XY005高致病性猪蓝耳病病毒荧光定量PCR检测试剂盒 hPRRSV40/96次XY006猪伪狂犬野毒病毒荧光定量PCR检测试剂盒 PRV-gE40/96次XY007猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测试剂盒 PCV40/96次XY008猪西尼罗河热病毒荧光定量PCR检测试剂盒 WNFV40/96次XY009猪乙型脑炎病毒荧光定量PCR检测试剂盒 JEV40/96次XY010非洲猪瘟病毒荧光定量PCR检测试剂盒 ASFV40/96次XY011猪细小病病毒荧光定量PCR检测试剂盒 PPV40/96次XY012猪传染性胃肠炎病毒荧光定量PCR检测试剂盒 TGEV40/96次XY013猪流行病腹泻病毒荧光定量PCR检测试剂盒 PEDV40/96次XY014猪轮状病毒A荧光定量PCR检测试剂盒 ROV-A40/96次XY015猪出血性魏氏梭菌荧光定量PCR检测试剂盒 CW40/96次XY016猪钩端螺旋体病荧光定量PCR检测试剂盒 LPP40/96次XY017猪传染性胸膜肺炎放线杆菌荧光定量PCR检测试剂盒 APP40/96次XY018猪传染性萎缩性鼻炎荧光定量PCR检测试剂盒 SAR40/96次XY019猪链球菌病荧光定量PCR检测试剂盒 PSS40/96次XY020猪传染性胃肠炎荧光定量PCR检测试剂盒 TGEV40/96次XY021猪流感病毒H3亚型荧光定量PCR检测试剂盒 SIV-H340/96次XY022猪流感病毒H1亚型荧光定量PCR检测试剂盒 SIV-H140/96次XY023猪流感病毒N1亚型荧光定量PCR检测试剂盒 SIV-N140/96次XY024猪流感病毒N2亚型荧光定量PCR检测试剂盒 SIV-N240/96次XY025SARS病毒荧光定量PCR检测试剂盒 SARS40次/盒XY026狂犬病荧光定量PCR检测试剂盒 RV40次/盒XY027轮状病毒荧光定量PCR检测试剂盒 HRV40次/盒XY028弓形虫荧光定量PCR检测试剂盒 Toxoplasma gondii40次/盒