pET-28a(+)-载体及构建-试剂-生物在线
pET-28a(+)

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产品名称: pET-28a(+)

英文名称: pET-28a(+)

产品编号: 60908-2793y

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产品产地: 中国

品牌商标: TIANDZ

更新时间: 2023-08-17T09:55:27

使用范围: null

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 pET-28a(+)载体选择主要考虑下述3点:

1】构建DNA重组体的目的,克隆扩增/表达表达,选择合适的克隆载体/表达载体。

2】.载体的类型:

1)克隆载体的克隆能力-据克隆片段大小(大选大,小选小)。如<10kb选质粒。

2)表达载体据受体细胞类型-原核/真核/穿梭,E.coli/哺乳类细胞表达载体。

3)对原核表达载体应该注意3点:

pET-28a(+)选择合适的启动子及相应的受体菌;

②用于表达真核蛋白质时注意克服4个困难和阅读框错位;

③表达天然蛋白质或融合蛋白作为相应载体的参考。

3】载体MCS中的酶切位点数与组成方向因载体不同而异,适应目的基因与载体易于链接,不产生阅读框架错位。

pET-28a(+)选用质粒(最常用)做载体的4点要求:

①选分子量小的质粒,即小载体(1-1.5kb)→不易损坏,在细菌里面拷贝数也多(也有大载体);

②一般使用松弛型质粒在细菌里扩增不受约束,一般10个以上的拷贝,而严谨型质粒<10个。

③必需具备一个以上的酶切位点,有选择的余地;

④必需有易检测的标记,多是抗生素的抗性基因,不特指多位Ampr(试一试)。

pET-28a(+)无论选用哪种载体,首先都要获得载体分子,然后采用适当的限制酶将载体DNA进行切割,获得分子,以便于与目的基因片段进行连接。XY065 坂崎肠杆菌核酸荧光PCR检测试剂盒 48

XY066 沙门菌/志贺菌核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48

XY067 副溶血性弧菌/霍乱弧菌核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48

XY068 嗜水气单胞菌/类致贺邻单胞菌核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48

XY069 小肠结肠炎耶尔森菌/弯曲菌核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48

XY070 空肠弯曲菌/结肠弯曲菌核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48

XY071 副溶血性弧菌TDH/TLH核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48

XY072 副溶血性弧菌TOXR/TRH核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48

XY073 霍乱弧菌O139/O1核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48

XY074 肠出血型大肠杆菌EHEC O157/H7核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48

XY075 肠出血型大肠杆菌EHEC O104/H4核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48

XY076 大肠杆菌O104/O157核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48

XY077 大肠杆菌致贺毒素(Stx1)/(Stx2)核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48

XY078 大肠杆菌致贺毒素黏附抹平因子(Eae)/溶血素(Hly)核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48

XY079 霍乱弧菌霍乱毒素基因(ctxA)/毒素共调菌毛亚单位基因(tcpA)核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48

XY080 副溶血性弧菌 TDH/TLH/TOXR/TRH核酸四重荧光PCR检测试剂盒 48

XY005 肠道病毒通用(EV-U)核酸荧光PCR检测试剂盒 48

XY006 手足口病肠道病毒(EV71)核酸荧光PCR检测试剂盒 48

XY007 手足口病科萨奇A16病毒(CoxA16)核酸荧光PCR检测试剂盒 48

XY008 乙脑病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48

XY009 腮腺炎病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48

XY010 单纯疱疹病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48

XY011 巨细胞病毒核酸荧光PCR检测试剂盒 48