phrGFP-N (Vitality)载体选择主要考虑下述3点：

【1】构建DNA重组体的目的，克隆扩增/表达表达，选择合适的克隆载体/表达载体。

【2】.载体的类型：

（1）克隆载体的克隆能力－据克隆片段大小（大选大，小选小）。如<10kb选质粒。

（2）表达载体据受体细胞类型－原核/真核/穿梭，E.coli/哺乳类细胞表达载体。

（3）对原核表达载体应该注意3点：

①phrGFP-N (Vitality)选择合适的启动子及相应的受体菌；

②用于表达真核蛋白质时注意克服4个困难和阅读框错位；

③表达天然蛋白质或融合蛋白作为相应载体的参考。

【3】载体MCS中的酶切位点数与组成方向因载体不同而异，适应目的基因与载体易于链接，不产生阅读框架错位。

phrGFP-N (Vitality)选用质粒（最常用）做载体的4点要求：

①选分子量小的质粒，即小载体（1－1.5kb）→不易损坏，在细菌里面拷贝数也多（也有大载体）；

②一般使用松弛型质粒在细菌里扩增不受约束，一般10个以上的拷贝，而严谨型质粒<10个。

③必需具备一个以上的酶切位点，有选择的余地；

④必需有易检测的标记，多是抗生素的抗性基因，不特指多位Ampr（试一试）。

phrGFP-N (Vitality)无论选用哪种载体，首先都要获得载体分子，然后采用适当的限制酶将载体DNA进行切割，获得分子，以便于与目的基因片段进行连接。XY51206Taq DNA聚合酶500U|5000UXY120401热启动Taq DNA聚合酶100UXY130606抗干扰Taq DNA 聚合酶100次XY130910Long-Taq DNA聚合酶500UXY90501Tth DNA聚合酶250UXY51207Pfu DNA聚合酶100UXY130429Phusion DNA聚合酶250UXY101002KOD DNA聚合酶250UXY131037Tfl DNA聚合酶100UXY130430E.coli DNA聚合酶 Ι500UXY100937φ29 DNA聚合酶250UXY120411T4 DNA 聚合酶50UXY130618T7 DNA 聚合酶(未修饰)300UXY130602Vent DNA 聚合酶100UXY131195Deep Vent DNA 聚合酶100UXY131182Sulfolobus DNA 聚合酶 IV100UXY130612Bst DNA 聚合酶，全长500UXY100209Bst DNA聚合酶，大片段800UXY130616Bsu DNA 聚合酶，大片段200UXY1306139°Nm DNA聚合酶200UXY130614Therminator DNA 聚合酶200UXY131196Therminator II DNA 聚合酶100UXY130617Therminator γ DNA 聚合酶200UXY60905MMLV逆转录酶10000U|50000UXY131209MMLV逆转录酶(H-)1000UXY131210耐热型MMLV逆转录酶(H-)1000UXY90502AMV逆转录酶200UXY120312末端脱氧核苷转移酶500UXY120509Poly(A)聚合酶20UXY130620Poly(U)聚合酶60UXY131124多核苷酸磷酸化酶100mgXY120307SP6 RNA聚合酶1000U|5000UXY120310T7 RNA聚合酶1000U|25000UXY120309T3 RNA聚合酶1000U|10000UXY130641T4 核酸内切酶 V2000UXY130643烷基腺嘌呤DNA糖基化酶500UXY1306458-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶80UXY130646尿嘧啶-DNA糖基化酶500UXY130647尿嘧啶糖基化酶抑制剂200UXY130648Afu 尿嘧啶-DNA 糖基化酶200UXY130666尿嘧啶切刻酶50UXY130649人单链选择性单功能尿嘧啶-DNA糖基化酶500UXY120505Dam 甲基转移酶500UXY120511CpG 甲基转移酶(M.SssI)100UXY130653GpC 甲基转移酶 (M.CviPI)200UXY120506T4聚核苷酸激酶200UXY130655热敏磷酸酶500UXY130552碱性磷酸酶，偶联级500UXY131125辣根过氧化物酶，偶联级100mgXY120405碱性磷酸酶，大肠杆菌25UXY120404碱性磷酸酶，牛小肠500UXY120403虾碱性磷酸酶300UXY130657无机焦磷酸酶，热稳定250UXY130658无机焦磷酸酶 (酵母)10UXY130659三磷酸腺苷双磷酸酶10000milliUXY130660ATP硫酸化酶10UXY120419大肠杆菌DNA连接酶1000UXY60609T4 DNA连接酶200UXY130621Taq DNA 连接酶1000UXY1306249°N DNA 连接酶2500UXY120421T4 RNA连接酶1000UXY130622T4 RNA连接酶 11000UXY130855T4 RNA 连接酶 2 (双链RNA连接酶 )150UXY130856T4 RNA 连接酶 2(截短型 )2000UXY130857T4 RNA 连接酶 2 (截短型 K227Q)2000UXY120510ATP依赖的Dnase200UXY131230DNase I干粉100mgXY130984DNase I溶液1.5mLXY90205RNase A干粉100mg|500mgXY3160RNase A溶液1.5mLXY120409BAL 31核酸酶50UXY101001Benzonase核酸酶500UXY130824冷启动核酸酶10000UXY120407S1核酸酶5000UXY120408绿豆核酸酶1000UXY120412微球菌核酸酶5000UXY120413核糖核酸酶H600UXY130675核糖核酸酶HII250UXY130637Tma 核酸内切酶 III500UXY130638核酸内切酶 IV1000UXY131228Tth 核酸内切酶 IV500UXY130640核酸内切酶 V250UXY130639核酸内切酶 III(Nth)1000UXY130642核酸内切酶 VIII1000UXY130635T7核酸内切酶 I250UXY130634人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶1000UXY120410核酸外切酶 I750UXY120420核酸外切酶 III2500UXY130627核酸外切酶 T250UXY130628Lambda 核酸外切酶1000UXY130629RecJf 核酸外切酶1000UXY130632T7 核酸外切酶1000UXY130672核糖核酸酶RNase If10000UXY120414DNA 拓扑异构酶 I100UXY130651DNA 促旋酶(E. coli )100UXY130665Cre 重组酶50UXY81106蛋白酶K干粉100mgXY80911蛋白酶K溶液1.5mLXY131025胰凝乳蛋白酶，测序级25μgXY131026弹性蛋白酶5mgXY120508肠激酶(轻链)0.032μg|0.063μgXY120507Xa因子蛋白酶25μg|50μgXY130867Furin 蛋白酶50UXY131027胃蛋白酶250mgXY130876PreScissiom 蛋白酶100UXY130872SUMO 蛋白酶5μgXY130875葡激酶100μgXY131183链激酶100μgXY130873TEV蛋白酶300UXY120708凝血酶1000UXY131028嗜热菌蛋白酶25mgXY131029胰蛋白酶，质谱级100μgXY130868人二硫键异构酶1mgXY130869人超氧化物歧化酶10kuXY120623β-琼脂糖酶Ⅰ100U|500UXY100406溶菌酶干粉10gXY100815溶菌酶溶液1.5mLXY131017乙酰化牛血清白蛋白400μLXY130874人玻连蛋白100μgXY130870硫氧还蛋白5mgXY131021链霉亲和素1mgXY130818HRP标记链霉亲和素0.1mLXY131022碱性磷酸酶标记链霉亲和素0.5mLXY131085亲和素10mgXY131086HRP标记亲和素2mgXY131087碱性磷酸酶标记亲和素100mgXY131088荧光素(FITC)标记亲和素5mgXY131090中性亲和素蛋白10mgXY131092生物素1gXY131093荧光素标记的生物素5mgXY131094生物素化的牛血清白蛋白25mgXY131095生物素化的辣根过氧化物酶5mgXY131096生物素化的碱性磷酸酶(AP)1mgXY131098生物素化蛋白G0.5mgXY131099生物素化蛋白A1mgXY131101生物素化蛋白L0.5mgXY131102生物素化兔IgG5mgXY130661RecA蛋白200μg|1000μgXY130662Tth RecA 蛋白100μgXY130663T4 噬菌体基因 32 蛋白100μg|500μgXY130664极高热稳定单链结合蛋白50μg

核酸电泳及回收