T4 DNA连接酶上海哈灵生物科技有限公司

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性能参数

产品名称: T4 DNA连接酶
英文名称: T4 RNA Ligase
产品货号: HLS10129
产品规格: 1ku/28ku
产品产地: 国产
产品商标: 哈灵
价    格: 1元
保存与运输: 咨询客服
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2017-6-20 11:53:00
浏览人数:1
诚信指数:55点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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上海哈灵生物科技有限公司
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产品详细描述

T4 DNA连接酶常用于催化双链DNA平末端或互补粘性末端之间的 连接反应,也能催化双链RNA 5′ -***酸末端和3′ -羟基末端间的连 接。还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。以上 反应均需消耗ATP。 随酶附带10×T4 DNA Ligation Buffer及独特配方的2×Quick Ligation Buffer提供给您更多的选择:而使用10×T4 DNA Ligation Buffer,16℃过夜连接可获得最高的连接效率;使用快连Buffer在室 温(25℃)下,仅需5分钟即可完成粘性末端或平滑末端DN**段的连接 反应。
使用建议:粘末端的连接反应:插入片段和载体的摩尔浓度比特别重要,此比例在2-6之间最好,低于2:1就会导致较低的连接效率,高于6:1则会导致多个插入。摩尔比请按载体与插入片段DNA浓度及分子大小来计算。
平滑末端的连接反应:平滑末端的连接反应与突出末端相比反应较慢(其Km值约为突出末端的100倍)。进行平滑末端的连接反应时,可提高DNA浓度,将使用酶量增加到突出末端量的2~5倍左右。 向粘粒或噬菌体进行连接反应:可使载体和插入DNA的摩尔比调整为1:1,同时增大DNA浓度以便取得良好效果。(0.05~0.1μg/μl以上)
反应温度: 该酶的最适温度为37℃,由于热稳定性较差,因此 长时间反应时通常需在16℃下进行。若反应1-2小时左右的话也可在室 温下进行反应。
抑制剂:T4 DNA连接酶要求Mg2+,因此螯合Mg2+的EDTA的存在会阻碍反应。将溶解于含有高浓度EDTA缓冲液中的DNA准备作为样品使用 ,最好先用灭菌蒸馏水或TE缓冲液进行置换。
储存条件: -20℃
用途: DN**段和载体DNA的连接
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