产品内容：
提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体10mL×1瓶，-20℃保存。
试剂二：液体10mL×1瓶，-20℃保存。
试剂三： 粉剂×2瓶，-20℃保存。用时每瓶加入5mL双蒸水充分溶解备用，用不完的试剂仍-20℃保存。
试剂四：液体15mL×1瓶，4℃保存。
 
产品说明：
GS（EC 6.3.1.2）主要存在于植物中，是生物体内氨同化的关键酶之一，催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺，不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性，而且谷氨酰胺也是氨的主要储存和运输形式。
    GS 在ATP 和Mg2+存在下，催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺；谷氨酰胺进一步转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸，在酸性条件下与铁形成红色的络合物；该络合物在540nm 处有最大吸收峰，可用分光光度计测定。
实验需自备的仪器和用品：
 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
 
操作步骤
一、样品测定的准备
称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
 
二、测定操作表
1、 分光光度计预热30min 以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。
2、 在EP 管中加入下列试剂：
试剂名称（μL）
测定管
对照管
试剂一
160
 
试剂二
 
160
试剂三
70
70
样本
70
70
混匀，37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）准确水浴30min
试剂四
100
100
 
混匀，静置10min 后，5000g，常温离心10min，取上清液测定540nm 处的吸光值A。△A=A测定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。
 
 
三、计算
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白在反应体系中每min 使540nm下吸光值变化0.01定义为一个酶活力单位。
GS（U/mg prot）＝ΔA×V反总÷（Cpr×V样）÷0.01÷T =19×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织在反应体系中每30min 使540nm下吸光值变化0.01定义为一个酶活力单位。
GS（U/g 鲜重）＝ΔA×V反总÷(V样÷V样总×W)÷0.01÷T =19×ΔA÷W
V反总：反应体系总体积，400μL； V样：加入样本体积，70μL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，30 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量，g；
b.用96孔板测定的计算公式如下
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白在反应体系中每min 使540nm下吸光值变化0.005定义为一个酶活力单位。
GS（U/mg prot）＝ΔA×V反总÷（Cpr×V样）÷0.01÷T =38×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织在反应体系中每30min 使540nm下吸光值变化0.005定义为一个酶活力单位。
GS（U/g 鲜重）＝ΔA×V反总÷(V样÷V样总×W)÷0.01÷T =38×ΔA÷W
V反总：反应体系总体积，400μL； V样：加入样本体积，70μL；V样总：加入提取液体积，1 mL；TTUNEology 波长可调检测卡盒-->