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蔗糖合成酶测定试剂盒

蔗糖合成酶测定试剂盒

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产品名称: 蔗糖合成酶测定试剂盒

英文名称: Sucrose Synthetase(SS) Assay Kit

产品编号: BC0580

产品价格: 0

产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三

品牌商标: Solarbio

更新时间: 2023-08-11T10:26:26

使用范围: null

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蔗糖合成酶测定试剂盒产品内容:

提取液:液体30mL×1瓶,4保存;

试剂一:液体4mL×1瓶,-20保存;

试剂二:1000μg/mL蔗糖溶液1mL×14保存;

试剂三:液体3mL×1瓶,4保存;

试剂四:液体40mL×1瓶,4保存;

试剂五:液体10mL×1瓶,4保存;

产品说明

蔗糖是源(叶片等)光合产物向“库”器官运输的主要形态。SSEC 2.4.1.13)催化植物体内游离果糖和葡萄糖合成蔗糖。

SS催化游离果糖与葡萄糖供体UDPG反应生成蔗糖,蔗糖与间苯二酚反应可呈现颜色变化,在480nm下有特征吸收峰,酶活力大小与颜色的深浅成正比。

试验中所需的仪器和试剂:

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水

蔗糖合成酶测定试剂盒操作步骤:

一、测定样品提取:   

按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。   

二、测定操作表:

按下表操作:

试剂名称(μL

测定管

对照管

标准管

空白

样本  

30

30

 

 

蒸馏水

 

150

150

180

试剂一

150

 

 

 

试剂二

 

 

30

 

混匀,25℃准确水浴10min

试剂三

50

50

50

50

沸水浴中煮沸10min左右(盖紧,以防止水分散失),冷却

试剂四

700

700

700

700

试剂五

200

200

200

200

混匀,沸水浴30min冷却后,480nm下测定各管吸光值。标准管和测定管只要做一管。每个测定管需要设定一个对照管。

 

三、蔗糖合成酶测定试剂盒SS活力单位的计算:

1、 按照蛋白浓度计算

单位定义:每mg组织蛋白每分钟催化产生1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。

SS活性g/min/mg prot)=C标准管×V1×(A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)÷(V1×Cpr)÷T=100×(A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)÷Cpr

2、 按照样本鲜重计算

单位定义:每g组织每分钟催化产生1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。

SS活性g/min /g鲜重)=C标准管×V1×(A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)÷(W×V1÷V2