肌酸激酶测定试剂盒北京索莱宝科技有限公司

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性能参数

产品名称: 肌酸激酶测定试剂盒
英文名称: Creatine Kinase Assay Kit
产品货号: BC1140
产品规格: 50管/48样
产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三
产品商标: Solarbio
价    格: 1480元
保存与运输: 4℃保存或-20℃保存;
现货状态: 现货
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2019/9/11 8:35:00
浏览人数:94
诚信指数:1279点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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产品详细描述

肌酸激酶测定试剂盒产品内容:

提取液:液体60mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:粉剂1 瓶,4℃避光保存,使用前加15mL 蒸馏水溶解。

试剂二:液体15mL×1 瓶,4℃保存。

工作液:临用前根据用量将试剂一和试剂二以1:1 混合。使用前37℃温育2min。 产品说明:

CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心脏、肌肉以及脑等组织中,能可逆地催化肌酸与ATP 之间的转*** 酰基反应,在能量运转、肌肉收缩和ATP 再生中有重要作用,是临床诊断心脑疾病的一个重要指标。 CK 催化***酸肌酸和ADP 生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP 与葡萄糖形成6-***酸葡萄糖, 6-*** 酸葡萄糖脱氢酶催化6-***酸葡萄糖与NADP+生成NADPH,导致340nm 光吸收值增加。 自备实验用品及仪器: 天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计、1 mL 石英比色皿和蒸馏水。

 

操作步骤:

一、粗酶液提取

1. 组织样本:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10 的比例(建议称取约0.1g 组织,加 入1mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃离心15min,取上清,置冰上待测。

2. 血清样本:直接测定。

二、测定操作表  

 

空白管

测定管

 酶液(μ L)

 

200

工作液(μ L)

500

500

 H2O(μ L)

500

300

混匀,于1mL 石英比色皿,对照管调零,测定340nm 的初始值A1,测定完立即放入37℃ 水浴,准确计时,分别测定1min,2min,3min 时的吸光值A2,计算时取平均值,△A= A2-A1。

 注意:空白管只需测定一次。

肌酸激酶测定试剂盒 

三、CK 活性计算公式

1、按组织蛋白含量计算

酶活定义:37℃,pH7.0 时,每毫克蛋白质1min 内催化产生1nmol NADPH 为一个酶活单位。

CK 活性(nmol/min/mg prot)=△A ÷(e×d)×V反总÷(V样×Cpr)= 804×△A÷Cpr  

2、按组织样本质量计算:

酶活定义:37℃,pH7.0 时,每克样品1min 内催化产生1nmol NADPH 为一个酶活单位。

CK 活性(nmol/min/g)= △A ÷(e×d)×V反总÷(V样÷V样总×W)= 804×△A÷W

3. 按血清计算:

酶活定义:37℃,pH7.0 时,每升血清1min 内催化产生1nmol NADPH 为一个酶活单位。

CK 活性(nmol/min /L)= △A ÷(e×d)×V反总÷V样×1000= 804000×△A e:NADPH 微摩尔消光系数,6.22×10 -3 L/μmol/cm;d:比色皿光径,1cm;V 反总:反应体 系总体积,1mL;V 样:反应体系中样本体积,0.2mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质 量,g。

 

注意事项

1. 配制好的工作液4℃稳定7 天,请尽量配制后尽快使用。

2. 血清的CK 不稳定,采集样本后尽快测定,4℃避光保存可稳定24h。

3. 样品蛋白质含量需要另外测定,可选用BCA 蛋白含量测定试剂盒进行测定。 4. OD 值大于 0.5 可用提取液适当稀释样品,并在计算公式中相应的改变稀释倍数。

 

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