产品内容：

提取液：液体30mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。

试剂二：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。

试剂三：液体30mL×1瓶，4℃避光保存，变成蓝绿色不能使用。

标准品：液体1mL×1支，2μmol/mL酚标准液，4℃保存。临用前蒸馏水稀释至0.5μmol/mL备用。

产品说明：

ACP在酸性条件下催化磷酸单酯水解称无机磷酸，常见于巨噬细胞的溶酶体内。ACP常用于前列腺癌的辅助诊断。

在酸性环境中，ACP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚，苯酚与4-氨基安替和铁*化钾反应生成红色亚醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通过测定510nm吸光度增加速率，来计算ACP活性。

自备仪器和用品：

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、 粗酶液提取：

称取约0.1g组织，加提取液1mL充分研磨，4℃、10000rpm离心10min，取上清液待测。血液可直接用于测定，如果浓度高的话，用提取液稀释。

二、 测定操作：

1.分光光度计预热30 min以上，调节波长到510 nm，蒸馏水调零。

2. 试剂一置于37℃水浴中预热30 min以上。

三、ACP活性计算： 

1.按蛋白浓度计算

活性单位定义：37℃中每毫克蛋白每分钟催化产生1 μmol酚。

ACP(U/mg pr)= [C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样]÷(Cpr×V样)÷T

            =0.033×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管) ÷Cpr

2.按样本鲜重计算

活性单位定义：37℃中每克组织每分钟催化产生1 μmol酚。

ACP活力(U/g)= [C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样] ÷(W÷V提取×V样)÷T

             =0.033×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷W

3.血液中ACP活性计算

活性单位定义：37℃中每毫升血液每分钟催化产生1μmol酚。

ACP活力(U)= [C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样] ÷V样÷T

            =0.033×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)

    C标准品：0.5μmol/mL； V样：加入反应体系中上清液体积（mL），0.1mL；V样总：1mL；T：反应时间（min），15 min；V提取：加入提取液体积，1mL；W：样本鲜重，g。

注意事项：

1、 试剂一、试剂二和试剂三均需避光保存。

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