酿酒酵母EGY48菌种的来源、传代、分离复壮、使用和鉴定等均应该做好详细记录。包括菌种时间、名称、菌号、代数、保存方式、分离复壮方式、使用内容、鉴定情况等。

菌种保藏由于影响因素过多，细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决，因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。      

1. 酿酒酵母EGY48菌种培养试剂的保存：

   血清：-5oC - -20oC 保存，避免反复冻融。

   培养基:  2oC – 8oC避光保存。

   完全培养基: 2oC – 8oC避光保存，并在2周内用完。

   尽量缩短血清和培养基见光的时间

 2.液体培养基中谷氨酰胺使用方法：

很多细胞生长要求在培养液中添加谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20◦C冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4◦C 冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。酿酒酵母EGY48菌种另一种选择是使用L-谷氨酰胺的衍生物 - L-alanyl-L-glutamine dipeptide（如GenDepot的产品Glutaplex配方中含有的成分之一） 替代L-谷氨酰胺。Glutaplex与L-谷氨酰胺相比更加稳定，降解比较慢，提高细胞的存活和生长，极大降低对细胞有毒性的氨的积累。

3.培养基中是否应加酚红：

 酿酒酵母EGY48菌种酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂，中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时紫色。研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用，特别是雌激素。为避免固醇类反应，培养细胞尤其是哺乳类细胞时，应使用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时不使用加酚红的培养基。EC835 HEH2 人胚胎心脏成纤维样细胞 人 1640 贴壁

EC836 ID8 小鼠卵巢癌细胞 小鼠 1640 贴壁

EC837 PG13 逆转录病毒包被的TK-NIH3T3细胞 小鼠 DMEM 贴壁

EC838 hEEC 人子宫内膜上皮细胞 人 EMEM 贴壁

EC839 WB-F344 大鼠肝干细胞 大鼠 DMEM 贴壁

EC842 MKN-28 人胃癌细胞 人 1640 贴壁

EC843 XWLC-05 人肺腺癌细胞 人 1640 贴壁

EC844 CAL-27 人舌鳞癌细胞 人 DMEM 贴壁

EC845 DiFi 人结直肠癌细胞 人 1640 贴壁

EC846 HPAEC 人肺动脉内皮细胞 人 1640 贴壁

EC847 HELF 人胚肺成纤维细胞 人 DMEM 贴壁

EC848 HCC1419 人乳腺导管癌细胞 人 DMEM 贴壁

EC850 HCC1954 BL 人外周血B细胞 人 1640 悬浮

EC849 HCC1954 人乳腺导管癌细胞 人 1640 贴壁

EC851 STO 小鼠胚胎成纤维细胞 小鼠 DMEM 贴壁

EC852 HR8348 人直肠腺癌细胞（低分化） 人 1640 贴壁

EC855 HRC99 人直肠腺癌细胞（中分化） 人 1640 贴壁

EC853 TFK-1 人胆管癌细胞 人 DMEM 贴壁

EC856 H-EMC-SS 人软骨肉瘤细胞 人 McCoy’s 5a 贴壁

EC857 Nb2-11 小鼠淋巴瘤细胞 小鼠 DMEM 悬浮

EC858 mRTEC 小鼠肾小管上皮细胞 小鼠 DMEM 贴壁