(RNA提取试剂盒)MiPure Cell/Tissue miRNA Kit(离心柱型)南京诺唯赞生物科技有限公司

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性能参数

产品名称: (RNA提取试剂盒)MiPure Cell/Tissue miRNA Kit(离心柱型)
英文名称: MiPure Cell/Tissue miRNA Kit(离心柱型)
产品货号: RC201
产品规格: 50rxn
产品产地: 南京
产品商标: vazyme
价    格: 2140元
保存与运输: -20℃
产品资料: 资料下载
更新时间: 2017-11-29 19:21:00
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诚信指数:304点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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产品详细描述

 MiPure Cell/Tissue miRNA Kit

 

 

  • miRNA提取效率高,起始量范围广

  • 大分子RNA及基因组DNA残留更少

  • 操作简便,兼容性强

 

 

miRNA提取效率高,起始量范围广

使用MiPure Cell/Tissue miRNA Kit与total RNA提取试剂(如TRIzol)分别提取相同起始量的5×10HEK293细胞或20 mg小鼠肝脏组织的miRNA和total RNA,使用相同体积RNase-Free水洗脱/溶解产物,琼脂糖凝胶电泳检测相同量产物结果如下图所示。对于细胞或小鼠组织,MiPure Cell/Tissue miRNA Kit提取得到的产物不含有大分子RNA如18S、28S RNA,且核糖体RNA含量少于total RNA。通过Vazyme# MR101 (miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop))进行逆转录和Vazyme# MQ101 (miRNA Universal SYBR qPCR Master Mix)进行qPCR检测相同量产物的miR-16基因结果显示,MiPure Cell/Tissue miRNA Kit对于小片段RNA(包含miRNA)的提取产量显著高于TRIzol提取的total RNA。

                     HEK293 Cell                                                  Mouse liver

 

使用102-106数量十倍梯度稀释的293细胞作为起始样本提取miRNA后检测U6 snRNA丰度如下图所示,5个10倍梯度稀释的样品提取产物显示极好的丰度及线性关系。

 

 

大分子RNA及基因组DNA残留更少

使用10 mg小鼠肝脏提取得到的高产量miRNA使用Oligo dT作为引物进行常规逆转录,并检测Actb基因(mRNA长度约1800 nt)表达残留。与Vender T与Vender Q同类产品比较,MiPure Cell/Tissue miRNA Kit提取小鼠组织得到的等量产物中mRNA残留更低。使用106个HEK293细胞提取得到的高产量miRNA产物直接进行针对GAPDH 3’-UTR区设计的极短产物PCR检测基因组残留,MiPure Cell/Tissue miRNA Kit产物的gDNA残留明显低于使用vender Q提取的等量产物。

 

                        小鼠肝的miRNA的mRNA残留                                      293细胞的miRNA的gDNA残留

 

 

 

操作简便,兼容性强

MiPure Cell/Tissue miRNA Kit提取组织/细胞miRNA流程与vender T和vender Q相应产品完全一致,结合高效的RNA Isolater抽提试剂和硅胶柱纯化技术,整个过程不超过1小时。其中裂解液RNA Isolater与基于酚与异硫*酸胍的商业化RNA提取试剂可兼容互换。

 

广泛的下游应用适用性

使用Vazyme 组织/细胞miRNA提取分离试剂盒提取得到的miRNA可用于常规qPCR、northern、micro-array等实验,同时更适用于小分子miRNA的建库实验及外泌体小RNA提取。对比相同起始量细胞/组织的total RNA,具有建库产物总量更高、mRNA及核糖体RNA干扰更少等优点。

以20 mg小鼠肝脏组织为对象分别使用MiPure Cell/Tissue miRNA Kit分离miRNA或使用TRIzol试剂提取total RNA,等体积洗脱或溶解RNA产物。得到的小分子RNA(约250-300ng/μl)及total RNA(约1.5 μg/μl)等体积起始建库。建库产物通过2100毛细管电泳检测如右图所示。

 

 

           miRNA样品建库产物2100电泳图                               total RNA 样品建库产物2100电泳图

 

 

 

MiPure Cell/Tissue miRNA Kit是基于硅胶柱吸附法开发的miRNA提取分离试剂盒,能有效提取长度20-200nt的小片段RNA,包括miRNA、siRNA等。高效的裂解液能轻松裂解各种动物组织和细胞,减少蛋白和杂质对产物的干扰,优化的硅胶吸附填料高效去除基因组DNA和大分子RNA,保证产物的高产量和高质量。试剂盒适合于从<5x 106真核培养细胞,<100 mg动物组织提取小分子RNA,得到的小分子RNA可直接用于芯片分析,Northern杂交,RT-PCR等。试剂盒也可用于提取总RNA,满足客户的不同需求。

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