M-MuLV反转录试剂盒
产品名称: M-MuLV反转录试剂盒
英文名称: M-MuLV反转录试剂盒
产品编号: XY05004N
产品价格: 0
产品产地: 中国/上海
品牌商标: XY-Bioscience
更新时间: 2023-08-17T09:55:27
使用范围: null
上海信裕生物科技有限公司
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M-MuLV反转录试剂盒
产品说明
本公司生产的莫洛尼氏鼠白血病病毒(M-MuLV)逆转录酶是一种RNA介导的DNA聚合酶。该酶能以RNA(合成cDNA时)或单链DNA做模板,由引物起始合成一条互补的DNA。本试剂盒含有1st Strand cDNA合成所需的全部试剂。合成的1st Strand cDNA可广泛用于2nd Strand合成、杂交、PCR扩增、Real Time PCR反应等。
本产品含有1st Strand cDNA合成所需的全部试剂,可用于如下方面:
⑴1st-Stand cDNA的合成;
⑵cDNA Probe的制备;
⑶RT-PCR反应以及Real Time RT-PCR反应。
⑴1st-Stand cDNA的合成;
⑵cDNA Probe的制备;
⑶RT-PCR反应以及Real Time RT-PCR反应。
M-MuLV 逆转录酶(100 U/μl) 200 μl
5× M-MuLV 逆转录酶buffer 1 ml
Oligo(dT)18 Primer(50 μM) 200 μl
dNTP Mixture(各10 mM) 200 μl
RNase Inhibitor(40 U/μl) 200 μl
DEPC-H2O 1 ml×4
5× M-MuLV 逆转录酶buffer 1 ml
Oligo(dT)18 Primer(50 μM) 200 μl
dNTP Mixture(各10 mM) 200 μl
RNase Inhibitor(40 U/μl) 200 μl
DEPC-H2O 1 ml×4
保存温度:-20 ℃(避免反复冻融)
有效日期:12个月
有效日期:12个月
建立20 μl 的反应体系可以用于逆转录500 ng~5 μg总RNA或1 ng~500 ng mRNA。
1. 将以下组分加入无核酸酶的微量离心管中:
2 轻柔混匀。65 ℃加热5分钟后迅速置于冰上冷却。短暂离心后加入以下组分:
3 缓慢混匀。37 ℃反应60分钟。
4 在70 ℃加热15分钟使逆转录酶失活以终止反应。
5 cDNA产物可以直接作为PCR的模板。如果扩增的PCR产物大于1 kb,则需要去除与cDNA互补的RNA。可以使用1 μl的E.coli RNase H在37 ℃孵育20分钟以去除与cDNA互补的RNA
1. 将以下组分加入无核酸酶的微量离心管中:
Oligo(dT)18 Primer | 1 μl |
模板RNA | 适量 |
dNTP Mixture | 1 μl |
DEPC-H2O | Up to 10 μl |
2 轻柔混匀。65 ℃加热5分钟后迅速置于冰上冷却。短暂离心后加入以下组分:
5× M-MuLV 逆转录酶buffer | 4 μl |
M-MuLV 逆转录酶 | 1 μl |
RNase Inhibitor | 1 μl |
DEPC-H2O | Up to 20 μl |
3 缓慢混匀。37 ℃反应60分钟。
4 在70 ℃加热15分钟使逆转录酶失活以终止反应。
5 cDNA产物可以直接作为PCR的模板。如果扩增的PCR产物大于1 kb,则需要去除与cDNA互补的RNA。可以使用1 μl的E.coli RNase H在37 ℃孵育20分钟以去除与cDNA互补的RNA