磷酸化蛋白提取试剂盒-蛋白纯化-试剂-生物在线
磷酸化蛋白提取试剂盒

磷酸化蛋白提取试剂盒

商家询价

产品名称: 磷酸化蛋白提取试剂盒

英文名称:

产品编号: BC3730

产品价格: 0

产品产地: 北京

品牌商标: Solarbio

更新时间: 2023-08-11T10:26:26

使用范围: null

北京索莱宝科技有限公司
  • 联系人 : 索莱宝-龚思雨
  • 地址 : 北京市通州区中关村科技园区通州园金桥科技产业基地景盛南四街15号85A三层
  • 邮编 : 101102
  • 所在区域 : 北京
  • 电话 : 178****1073
  • 传真 :
  • 邮箱 : 3193328036@qq.com

磷酸化蛋白提取试剂盒

货号BC3730

规格:50T /100T

有效期:至少 1 年。

产品组成:

名称 50T 100T Storage

裂解液 50ml 100 ml 2-8 ℃

磷酸酶抑制剂(100×) 0.5ml 1ml

蛋白酶抑制剂(100×) 0.5ml 1ml -20℃

PMSF(100×) 0.5ml 1ml

产品说明:

本试剂盒用于哺乳动物组织和细胞中提取胞质蛋白,试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂,作用较为强烈,可获得总蛋白,可用于免疫印迹实验等基础研究实验,由于含有上述的酶抑制剂,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品仅用于科研。

操作方法:

1、组织总蛋白的提取

1) 在 1ml 的冷裂解液中各加入 10ul 的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和 PMSF;混匀,放置在冰上备用;

2) 称取 0.1g 的新鲜组织,放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处,用眼科剪将组织块尽可能的剪碎,然后加入 0.5-1ml 的新配置的裂解液,研磨直至没有明显的组织块,这个过程注意冰上操作;

3) 将组织匀浆液移入 1.5ml 的 EP 管中,4 ℃ 12000g 离心 30min;

4) 吸取上清至新的管中;

5) 进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。

(提取好的蛋白建议保存于-80℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)

2、细胞总蛋白的提取

1) 裂解液的用量:107个细胞需要裂解液 1ml;

2) 贴壁细胞:弃去培养基,用冷的 PBS 洗两次,弃去 PBS,然后加入计算好的细胞裂解液;在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞,将刮离的细胞裂解液移入 EP 管中,颠倒裂解 20-30min。

3) 悬浮细胞:4℃ 400g 离心收集细胞,用冷的 PBS 洗两次细胞,同样按细胞数加入裂解液,涡旋10s,放置冰上裂解 10min,重复 3-4 次;

4) 裂解完毕之后,将细胞裂解液 4 ℃12000g 离心 30min;

5) 将上清移入新的 EP 管中;进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。

(提取好的蛋白建议保存于-80℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)

注意事项:

1. 实验过程,所有试剂都要需要预冷或者即融,保证操作过程中的低温环境。

2. PSMF(有毒)现用现加,因为 PMSF 在水溶液中会快速降解。

相关文献:

《Proanthocyanidins Protect against β-Hydroxybutyrate-Induced Oxidative Damage in Bovine Endometrial Cells》 作者:Xi Cheng,Shuhua Yang,Chuang Xu, Lanzhi Li,Yi Zhang, Yang Guo, Cai Zhang, Peng Li, Miao Long,Jianbin He 期刊:Molecules. 影响因子:3.098 PMID:30678309
《Luteoloside attenuates neuroinflammation in focal cerebral ischemia in rats via regulation of the PPARγ/Nrf2/NF-κB signaling pathway》 作者:Qiaoling Li,Zixia Tian,Minghui Wang,Jiejian Kou,Chunli Wang,Xuli Rong,Jing Li,Xinmei Xie,Xiaobin Pang 期刊:International Immunopharmacology 影响因子:3.361 PMID:30502652
《β?elemene inhibits oxygen?induced retinal neovascularization via promoting miR?27a and reducing VEGF expression》 作者:Weilai Zhang, Lei Chen ,Jin Geng, Limin Liu, Li Xu 期刊:Molecular Medicine Reports 影响因子:1.851 PMID:30664207