过氧化氢测定盒 微量法北京索莱宝科技有限公司--实验室产品

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性能参数

产品名称: 过氧化氢测定盒 微量法
产品货号: BC3595
产品规格: 100管/96样
产品产地: 北京市通州区联东U谷85A三层
产品商标: Solarbio
价    格: 430元
保存与运输: 2-8℃长期保存
现货状态: 现货
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2019/4/19 17:10:00
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北京索莱宝科技有限公司--实验室产品
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产品详细描述

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 公司传真: 010-56371281

 产品名称:过氧化氢测定试剂盒 微量法

产品英文名:Micro Hydrogen Peroxide(H2O2) Assay Kit

产品货号:BC3595                          产地:北京市通州区马驹桥联东U85A三楼

产品规格:100管/96样                    产品商标:solarbio

保存与运输:4保存或-20保存;            参考价格:430

库存状态:现货                          

关键字:过氧化氢试剂盒

 

简要介绍:

H2O2是生物体内最常见的活性氧分子,主要由SOD和XOD等催化产生,由CAT和POD等催化降解。H2O2不仅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互转化的枢纽。一方面,H2O2可以直接或间接地氧化细胞内核酸,蛋白质等生物大分子,并使细胞膜遭受损害,从而加速细胞的衰老和解体;另一方面H2O2也是许多氧化应急反应中的关键调节因子

产品详细描述

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规格

基本售价:

选择规格

BC3595-100/96

Solarbio 

100/96

430.00

 

 

产品内容: 

试剂一:丙*** 100mL×1 瓶,4℃保存;(自备)

试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 3mL 浓盐酸充分溶解备用。用不完的试剂 4℃保存;

试剂三:液体 6mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:液体 30mL×1 瓶,4℃保存;

标准品:液体 1mL×1 支,4℃保存,1mmol/mLH2O2标准液。

 

产品说明: 

H2O2是生物体内最常见的活性氧分子,主要由 SOD 和 XOD 等催化产生,由 CAT 和 POD 等催 化降解。H2O2不仅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互转化的枢纽。一方面,H2O2可以直接或 间接地氧化细胞内核酸,蛋白质等生物大分子,并使细胞膜遭受损害,从而加速细胞的衰老和解体; 另一方面 H2O2也是许多氧化应急反应中的关键调节因子。 H2O2与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物,在 415nm 有特征吸收。

 

需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、丙***、浓盐 酸、研钵和冰。

 

操作步骤: 

一、H2O2提取: 

1、细菌或细胞样品的制备: 收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一,超声 波破碎细菌或细胞(功率 20%,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g4℃离心 10min,取上清, 置冰上待测。

2. 组织样品的制备: 称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一进行冰浴匀浆;8000g4℃离心 10min,取上清,置冰上待 测。

3、血清(浆)样品:按照每 100μL 血清(浆)加入 0.9mL 试剂一的比例充分混匀;8000g4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

注意事项:

1、由于试剂一易挥发,试剂一必须先预冷再加,研磨时必须在冰上研磨。

2、本试剂盒中试剂的挥发性较高,请带一次性手套和口罩。

 

二、测定步骤:

1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 415nm,蒸馏水调零。

2、将试剂二、三和四 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上。

3、如果用 96 孔板将则用丙***将 1mmol/mL 标准液稀释为 2μmol/mL 的标准溶液,用微量玻璃比色 则用丙***将 1mmol/mL 标准液稀释为 1μmol/mL 的标准溶液。

4、在 EP 管中按顺序加入下列试剂 试剂名称(μL)

试剂名称(μL)

测定管

标准管

对照管

样本

250

 

 

标准溶液

 

250

 

试剂一

 

 

250

试剂二

25

25

25

试剂三

50

50

50

4000g,常温离心 10min,弃上清,留沉淀

试剂四

250

250

250

加入试剂四溶解沉淀后(可先用丙***清洗 3-5 次来洗去植物色素),室温静置 5min,取 200μL 转移至微量玻璃比色皿或 96 孔板中测定 415nm 处吸光值。对照管只要做一次即可。计算A 测定=A 测定管-A 对照管,A 标准=A 标准管-A 对照管。

 

三、H2O2含量计算: 

1、按照细菌、细胞数量计算: H2O2含量(μmol/104cell)=A 测定÷(A 标准÷C 标液)×V 样本÷(500×V 样本÷V 提取) =0.004×A 测定÷A 标准。

2、按组织鲜重计算: H2O2含量(μmol/g 鲜重)=A 测定÷(A 标准÷C 标液)×V 样本÷(V 样本÷V 提取×W) =2×A 测定÷A 标准÷W。

3、按照蛋白浓度计算: H2O2含量(μmol/mgprot)=A 测定÷(A 标准÷C 标液)×V 样本÷(Cpr×V 样本) =2×A 测定÷A 标准÷Cpr。

4、按血清(浆)体积计算: H2O2含量(μmol/mL)=A 测定÷(A 标准÷C 标液)×10 =20×A 测定÷A 标准。 500:细胞或细菌总数,万个;C 标液:H2O2标准溶液浓度,2μmol/mL;V 样本:加入的样本 体积,0.25mL;W:组织鲜重,g;V 提取:提取过程中所用体积,1mL;Cpr:样品蛋白浓度,mg/mL; 10:血清稀释倍数,[0.1mL 血清(浆)+0.9mL 试剂一]÷0.1mL 血清(浆)=10。

 

注意:如果用微量玻璃比色皿(光径 d=1cm)将 1mmol/mL 标准液稀释为 1μmol/mL 的标准溶液。 计算公式亦作改变。

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公司地址:北京市通州区马驹桥联东U 85A

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