Fluo-3, AM试剂盒北京索莱宝科技有限公司

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性能参数

产品名称: Fluo-3, AM试剂盒
产品货号: CA1180
产品规格: 200T
产品产地: 北京
产品商标: solarbio
价    格: 900元
保存与运输: 至少一年
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2019/7/12 14:52:00
浏览人数:13
诚信指数:1287点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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产品详细描述

Fluo-3, AM 试剂盒

货号: CA1180

有效期:至少一年。

产品内容:

名称 规格 Storage

5mM Fluo-3, AM 20μL -20℃干燥避光

20% Pluronic F127 20μL RT 干燥避光

HBSS 75 ml×2 4℃

HEPES buffer saline 100ml 4℃

产品说明:

Fluo-3, AM(MW: 1129.85)是最常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成 Fluo-3 ,从而被滞留在细胞内,Fluo-3 若以游离配体形式存在时几乎是非荧光性的,但是当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光,最大激发波长为506nm ,最大发射波长为 526nm 。实际检测时推荐使用的激发波长为 488nm 左右,发射波长为525~530nm 。可以使用可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。

操作说明:

1. 向 Fluo-3,AM/DMSO 溶液中加入等体积的 20%的 Pluronic F127 溶液,Pluronic F127 可以防止Fluo-3,AM 在 HBSS 中聚合并能够帮助其进入细胞。

注意:不建议在 Pluronic F127 中长期保存 Fluo-3,AM 溶液。Pluronic F127 的量可以适当调整。Pluronic F127 和 Fluo-3,AM 一定要确保完全溶解后才可使用。

2. 将 Fluo-3, AM 工作液加入细胞,在 37℃培养 20 分钟。

3. 加入 5 倍体积的含有 1%胎牛血清的 HBSS,再继续培养 40 分钟。

4. 用 HEPES buffer saline 洗涤细胞 3 次,然后用 HEPES buffer saline 使细胞重悬浮,制成 1×105cells/mL 的溶液。

5. 37℃下培养 10 分钟,然后用该细胞进行荧光钙离子检测。激发波长 506nm,发射波长 526nm。*标记的条件因细胞种类而异,在每次实验前,请先确定最佳条件。以上方法仅供参考。

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