大肠杆菌表达重组肠激酶（不带标签）
产品名称： 大肠杆菌表达重组肠激酶（不带标签）
英文名称： Enterokinase, Recombinant, Expressed in E.coli
产品编号： 20401ES60
产品价格： 408.00
产品产地： 翌圣生物
品牌商标： Yeasen
更新时间： 2023-11-14T09:07:42
使用范围： null
| 规格 | 价格 |
| 100U | 408.0 |
| 200U | 618.0 |
| 500U | 1188.0 |
| 1000U | 2145.0 |
| 5000U | 6745.0 |
- 联系人 : 李自转
- 地址 : 上海市浦东新区天雄路166弄一号楼三层南单元
- 邮编 : 200030
- 所在区域 : 上海
- 电话 : 139****5640
- 传真 : 021-34615995-188
- 邮箱 : lizizhuan@yeasen.com
产品描述
重组肠激酶（rEK）是高纯度的牛肠激酶轻链亚基，它有着和天然提取的肠激酶同样特异的切割酶活性，切割位点Asp-Asp-Asp-Asp-Lys，可去除位于蛋白N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合标签，本rEK具有比天然酶更高的切割活性。
本品为采用重组大肠杆菌分泌表达的高纯度、高活性、高特异的牛肠激酶，适用范围广，并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。本品不含标签，由于具有极高酶切活性，酶切反应使用量少，不影响下游蛋白应用，故后续不需将其去除。
产品组分
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编号 |
组分 |
产品编号/规格 |
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20401ES60 |
20401ES70 |
20401ES76 |
20401ES80 |
20401ES90 |
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20401 |
rEK重组肠激酶 |
100 U |
200 U |
500 U |
1000 U |
5000 U |
运输和保存方法
冰袋运输。试剂盒内各组分-20°C保存两年，尽量避免反复冻融（5次以内没问题）。
基本特性
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来源（Source） |
E.Coli |
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分子量（Molecular Weight） |
理论值25.850 kDa |
| 外观（Appearance） | 无菌液体 |
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酶浓度（Enzyme Concentration） |
≥5 U/uL |
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活性定义（Activity Definition） |
一个活性单位定义为25°C，12-16 h，在25 mM Tris-HCl，Ph 8.0缓冲体系下，将500 μg带有肠激酶酶切位点的融合蛋白切开95%所需要的酶量 |
| 内毒素检测（Endotoxin） | 用LAL法测定内毒素含量小于1 EU/μg |
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质量保证（Quality assurance） |
经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；本制品中不含有非特异性的蛋白酶切活性 |
| 常见影响肠激酶活性的因素（Influence factors） | >2 M尿素，>200 mM NaCl，>20 mM β-ME，>0.1%SDS，>50 mM咪唑，或>5%甘油 |
应用举例
【注】该酶效力高且待切蛋白结构性质不同，建议先进行预实验摸索酶使用浓度及酶切反应时间。
1）反应体系
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融合蛋白 |
0.05-0.1 mg（蛋白浓度：0.1-1 mg/mL） |
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Enterokinase |
0.1-0.2 U |
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缓冲体系 |
25 mM Tris-HCL 8.0 |
注：缓冲液的使用体积等比例融合蛋白和酶使用量的总和。
2）反应条件：25°C过夜酶切（注：完全酶切需要16-24 h）。
【注】重组肠激酶可使用25 mM Tris-HCl pH 8.0稀释成每1 μL含0.1单位的溶液使用。
反应条件：4°C低温酶切条件，完全酶切需要48-64 h 或者增加2-3倍酶量。
注意事项
1）本产品所讲述的缓冲体系需要自行配置。
2）在＞200mM咪唑，或＞200mM NaCl，或＞5%甘油，酶切会受到影响。如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种，为获得理想的酶切结果，请先将样品透析到25 mM Tris-HCl 8.0缓冲液中，然后再进行酶切实验；若不方便透析，可将样品稀释，使得各组分低于干扰浓度后再酶切，酶的用量与蛋白比例不变；若干扰因素很多，且不便去除，需要适当增加酶量或延长酶切时间，有助于得到理想的酶切效果。
3）磷酸盐对Enterokinase有很强的抑制作用，痕量的磷酸盐都会严重影响Enterokinase的活性，因此在酶切体系内不能存在磷酸盐。
4）本品是具有高酶活力重组肠激酶，切割蛋白使用量少，可不考虑除去。
5）蛋白酶切效果不好，可适当增加酶量，或适当延长酶切时间。
6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
HB220829