丙二醛(MDA)含量检测试剂盒,酶标仪检测法北京索莱宝科技有限公司

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性能参数

产品名称: 丙二醛(MDA)含量检测试剂盒,酶标仪检测法
英文名称: Micro Malondialdehyde (MDA) Assay Kit
产品货号: BC0025
产品规格: 100管/96样
产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三
产品商标: Solarbio
价    格: 580元
保存与运输: 4℃保存或-20℃保存;
现货状态: 现货
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2019/10/10 14:46:00
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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产品详细描述

丙二醛(MDA)含量检测试剂盒(微量法)

品牌:Solarbio | 货号:BC0025
商品货号:商品品牌:规格基本售价:选择规格
BC0025-100管/96样Solarbio100管/96样390.00元

产品内容: 提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存; 试剂一:液体 30mL×1 瓶,4℃保存; 试剂二:粉剂×2 瓶,4℃保存; MDA 检测工作液的配制:用时在每瓶试剂二中加入 15mL 试剂一,溶解混匀,4℃保存待用。 试剂三:液体 10mL×1 瓶,4℃保存;

注意事项:

MDA 检测工作液较难溶解,可以 70℃加热,并剧烈振荡以促进溶解。或者通过超声处

理以促进溶解。

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

产品说明: 氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质;后者逐渐分解为一系列复杂的化合物, 其中包括丙二醛 MDA。通过检测 MDA 的水平即可检测脂质氧化的水平。 丙二醛(MDA)在酸性和高温条件下,可以与硫代***酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生 成棕红色的三甲川(3,5,5-三甲基恶唑-2,4-二***),其最大吸收波长在 532nm。进行比色后可估测 样品中过氧化脂质的含量。但是测定植物组织中 MDA 时受多种物质的干扰,其中最主要的是可溶 性糖,糖与 TBA 显色反应产物的最大吸收波长在 450nm,但 532nm 处也有吸收。所以同时测定 600nm、 532nm、450nm 下的吸光度,利用 532nm 与 450nm、600nm 下的吸光度的差值计算 MDA 的含量。 由于植物中受蔗糖干扰较大,动物中受葡萄糖干扰较大,所以本试剂盒有针对蔗糖和葡萄糖的 两个公式。若所测样品为油脂类物质,则两个公式均可。

需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研 钵、冰和蒸馏水。

操作步骤: 一、MDA 提取 1、细菌或细胞样品的制备:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每 400 万细菌或细 胞加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率 20%,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃ 离心 10min,取上清,置冰上待测。 2. 组织样品的制备:称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆;8000g 4℃离心 10min,取 上清,置冰上待测。 3. 血清(浆):直接检测。

二、测定步骤: 1、可见分光光度计/酶标仪预热 30min 以上,蒸馏水调零。 2、按下表步骤加样: 混合液在 100℃水浴中保温 60min 后(盖紧,防止水分散失),置于冰浴中冷却,10000g,常温, 离心 10min。吸取 200μL 上清液于微量玻璃比色皿或 96 孔板中,测定各样品在 450nm、532nm 和 600nm 处的吸光度。分别计算∆A450=A450 测定-A450 空白,∆A532=A532 测定-A532 空白,∆A600=A600 测 定-A600 空白。空白管只需做 1-2 次。


三、MDA 含量计算:


a.按 96 孔板计算

1、细菌、细胞或动物组织中 MDA 含量计算

(1)按照蛋白浓度计算 MDA 含量(nmol/mg prot)=(12.9×(∆A532-∆A600)-2.58×∆A450)×V 总÷(Cpr×V 样本) =5×(12.9×(∆A532-∆A600)-2.58×∆A450)÷Cpr (2)按照样品质量计算 MDA 含量(nmol/g 鲜重)=(12.9×(∆A532-∆A600)-2.58×∆A450)×V 总÷(W×V 样本÷V 提取) =5×(12.9×(∆A532 -∆A600)-2.58×∆A450)÷W (3) 按照细菌或细胞密度计算: MDA 含量(nmol/104 cell)=(12.9×(∆A532-∆A600)-2.58×∆A450)×V 总÷(400÷V 提取×V 样本) =0.125×(12.9×(∆A532-∆A600)-2.58×∆A450) (4)按血清(浆)体积计算: MDA 含量(nmol/mL)=(12.9×(∆A532-∆A600)-2.58×∆A450)×V 总÷V 样本 =5×(12.9×(∆A532 -∆A600)-2.58×∆A450) V 总:反应体系总体积,0.5mL;V 样品:加入样品体积,0.1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL。 W:样品质量,g;400:细胞或细菌总数,400 万;V 提取:提取液体积,1mL。

2、植物组织中 MDA 含量计算

(1)按照样品质量计算 MDA 含量(nmol/g 鲜重)=(12.9×(∆A532-∆A600)-1.12×∆A450)×V 总÷(W×V 样本÷V 提取) =5×(12.9×(∆A532-∆A600)-1.12×∆A450)÷W (2)按照蛋白浓度计算 MDA 含量(nmol/mg prot)=(12.9×(∆A532-∆A600)-1.12×∆A450)×V 总÷(Cpr×V 样本) =5×(12.9×(∆A532-∆A600)-1.12×∆A450)÷Cpr V 总:反应体系总体积,0.5mL;V 样品:加入样品体积,0.1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;

W:样品质量,g;V 提取:提取液体积,1mL。

b.按微量比色皿计算

1、细菌、细胞或动物组织中 MDA 含量计算

(1)按照蛋白浓度计算 MDA 含量(nmol/mg prot)=(6.45 ×(∆A532-∆A600)-1.29×∆A450)×V 总÷(Cpr×V 样本) =5×(6.45 ×(∆A532-∆A600)-1.29×∆A450)÷Cpr (2)按照样品质量计算 MDA 含量(nmol/g 鲜重)=(6.45 ×(∆A532-∆A600)-1.29×∆A450)×V 总÷(W×V 样本÷V 提取) =5×(6.45 ×(∆A532-∆A600)-1.29×∆A450)÷W (3) 按照细菌或细胞密度计算: MDA 含量(nmol/104 cell)=(6.45 ×(∆A532-∆A600)-1.29×∆A450)×V 总÷(400×V 样本÷V 提取) =0.0125×(6.45 ×(∆A532-∆A600)-1.29×∆A450) (4)按血清(浆)体积计算: MDA 含量(nmol/mL)=(6.45×(∆A532-∆A600)-1.29×∆A450)×V 总÷V 样本 =5×(6.45×(∆A532 -∆A600)-1.29×∆A450) V 总:反应体系总体积,0.5mL;V 样品:加入样品体积,0.1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL; W:样品质量,g;400:细胞或细菌总数,400 万;V 提取:提取液体积,1mL。

2、植物组织中 MDA 含量计算

(1)按照样品质量计算 MDA 含量(nmol/g 鲜重)=(6.45 ×(∆A532-∆A600)-0.56×∆A450)×V 总÷(W×V 样本÷V 提取) =5×(6.45 ×(∆A532-∆A600)-0.56×∆A450)÷W (2)按照蛋白浓度计算 MDA 含量(nmol/mg prot)=(6.45 ×(∆A532-∆A600)-0.56×∆A450)×V 总÷(Cpr×V 样本) =5×(6.45 ×(∆A532-∆A600)-0.56×∆A450)÷Cpr V 总:反应体系总体积,0.5mL;V 样品:加入样品体积,0.1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL; W:样品质量,g;V 提取:提取液体积,1mL。

注意事项: 若发现检测样本吸光值过低,可以将沸水浴时间 60min 调整为 90min 或者更长,但同一实验中 的 MDA 的检测都需要延长到同一时间以免引起误差。


文献引用

1、 《Ocular toxicity of reduced graphene oxide or graphene oxide exposure in mouse eyes》 作者:Wenzhen An,Ying Zhang,Xuan Zhang,Kang Li,Yujun Kang,Shahnaz Akhtar, Xueli Sha,Lan Gao 上线时间:September 2018 ;期刊《Experimental Eye Research》;影响因子:2.998;PMID:29803558 2、 《Knockdown of lncRNA AK139328 alleviates myocardial ischaemia/reperfusion injury in diabetic mice via modulating miR‐204‐4p and inhibiting autophagy》 作者:Si‐yang Yu, Bo Dong , Zhen‐fei Fang, Xin‐qun Hu, Liang Tang , Sheng‐hua Zhou 上线时间:25 July 2018 期刊《Journal of Cellular and Molecular Medicine》 影响因子:4.658 PMID:30047214 3、 《Inhibiting the CD38/cADPR pathway protected rats against sepsis associated brain injury》作者:Qian-Yi Peng,Yi-Min Wang,Cai-Xia Chen,Yu Zou,Li-Na Zhang,Song-Yun Deng,Yu-Hang Ai 上线时间:1 January 2018 期刊:《Brain Research》影响因子:2.929 PIMD:29030054 4、 《Hydrogen-water ameliorates radiation-induced gastrointestinal toxicity via MyD88’s effects on the gut microbiota》 作者:Hui-wen Xiao, Yuan Li, Dan Luo, Jia-li Dong, Li-xin Zhou, Shu-yi Zhao, Qi-sheng Zheng, Hai-chao Wang, Ming Cui & Sai-jun Fan 上线时间:26 January 2018 期刊:《experimental and molecular medicine》 影响因子:4.743 PMID:29371696 5、 《Toxic effect of microcystin-LR on blood vessel development》 作者:Qilong Wang, Guosheng Xiao, Guoliang Chen, Huihui Du, Linping Wang,Dongqin Guo & Tingzhang Hu 上线时间:05 Feb 2019 期刊:《Toxicological & Environmental Chemistry》 影响因子:3.547 PMID:28189720 6、 《A C2H2 zinc-finger protein OsZFP213 interacts with OsMAPK3 to enhance salt tolerance in rice》 作者:Zeyong Zhang,Huanhuan Liu,Ce Sun,Qibin Ma,Huaiyu Bu,Kang Chong,Yunyuan Xu 上线时间:October 2018 期刊:《Journal of Plant Physiology》 影响因子:2.825 PMID:30055519 7、 《Physiological and transcriptomic analysis revealed the involvement of crucial factors in heat stress response of Rhododendron hainanense》 作者:Ying Zhao,Wengang Yu,Xiangyu Hu,Youhai Shi,Yu Liu,Yunfang Zhong,Peng Wang,Shuya Deng,Jun Niu,Xudong Yu 上线时间:20 June 2018 期刊:《Gene》 影响因子:2.638 PMID:29604462 8、 《Environmental stress stability of pectin-stabilized resveratrol liposomes with different degree of esterification》 作者:Ping Shao,Pei Wang,Ben Niu,Ji Kang 上线时间:November 2018 期刊:《International Journal of Biological Macromolecules》 影响因子:4.784 PMID:30036624






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