MycAwayTM-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit UNG Plus一步法快速支原体检测试剂盒(防污染版)上海翊圣生物科技有限公司

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性能参数

产品名称: MycAwayTM-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit UNG Plus一步法快速支原体检测试剂盒(防污染版)
英文名称: MycAwayTM-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit UNG Plus一步法快速支原体检测试剂盒(防污染版)
产品货号: 40612ES25
产品规格: 25 T
产品产地: china
产品商标: YEASEN
价    格: 1158元
保存与运输: 冰袋(wet ice)运输。
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2019/12/8 17:36:00
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诚信指数:901点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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产品详细描述

MycAway™ -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit UNG Plus

一步法快速支原体检测试剂盒(防污染版

产品信息

产品名称

产品编号

规格

储存

价格(元)

特价(元)

MycAwayTM-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit UNG Plus一步法快速支原体检测试剂盒(防污染

40612ES25

25 T

-20 °C

1653.00

1158.00

40612ES60

100 T

-20 °C

6283.00

4398.00

产品描述

MycAwayTM -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit UNG Plus(防污染)是利用Yeasen独特的等温扩增技术,专门针对细胞培养液中支原体污染的快速检测产品。较以往支原体检测产品(货号:40611),本试剂盒中加入了UDG酶,以便去除含dUPCR产物气溶胶污染,在极大程度上抑制假阳性反应,提高检测的准确度。而且加入的UDG酶在室温下起作用,且对温度敏感、易于灭活,不影响实验结果。

主要原理是若细胞培养物被支原体污染,支原体DNA的保守序列会被大量、快速地扩增,使反应液由蓝紫色变成天蓝色,结果肉眼可辨,无需电泳。

翊圣MycAwayTM -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit UNG Plus(防污染)可以检测多种支原体,包括细胞培养过程中常见的8种支原体。传统巢式PCR支原体法检测法易受细胞培养上清中抑制物的影响,产生假阴性结果;反应后需开盖电泳检测,增加污染导致的假阳性风险。一步法支原体检测试剂盒完全没有上述缺点,且其检测灵敏度、准确性远远高于PCR法。

产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

40612ES25/25T

40612ES60/100T

40612-A

MycAwayTM -Color A

600 μL

600 μL×4

40612-B

MycAwayTM -Color B

25 μL

25 μL×4

40612-C                             

Positive Control

10 μL

10 μL×4

40612-D

矿物油

500 μL

500 μL×4

运输与保存方法

冰袋运输。

-20 °C避光保存,保质期18个月。若较长时间不用,请注意避光保存。

注意事项

1)使用本试剂前请仔细阅读说明书。

2)整个实验,应规范操作,包括反应体系的配制、样本处理及加样。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1. 支原体待检样本准备

贴壁细胞:直接吸取上清。建议在细胞传代或换液3天以上,且汇合度达到90%左右时取样,此时上清中支原体含量较高,便于检出。

悬浮细胞500 g离心5 min后,吸取上清。建议在细胞传代或换液3天以上时取样,此时支原体含量较高,便于检出。


2. 反应体系

MycAwayTM -Color-20 °C取出,溶解后颠倒混匀,瞬时离心确保所有液体落到管底。根据待检测样品量,配制如下体系(通常实验需要设置阴性对照和阳性对照):

 

单次反应体积 (μL)

 

总体积 (μL)

MycAwayTM -Color A

24

× 样品数 × 1.1*

_____

MycAwayTM -Color B

1

_____

*】:移液器存在误差,配制时请多出10%为保证分装后每管的量。

3. 加样

待测样品:向其余反应管中加入1 μL待测培养上清;

阴性对照:第一支反应管中不加入任何样品,作为阴性对照;

阳性对照:向最后一个反应管中加入1 μL Positive Control,作为阳性对照。

【注】:1) 如果反应是在水浴锅中进行,则每管加入20 μL矿物油,以防止液体蒸发导致结果的误差。如果反应是在PCR仪中进行,不需要加矿物油。

     2)实验室中支原体污染十分常见,鉴于本试剂盒反应灵敏,建议用户在超净台中配制组分,以免出现假阳性结果。

4. 反应条件

加完样后,先将样品在25~37 ℃放置5 min,再在水浴锅或PCR仪中,恒温63 °C孵育60 min

【注】:本试剂盒所用酶对温度非常敏感,强烈建议使用PCR仪操作;如用水浴锅,应先加热使其达到规定温度后再反应。温差超过2 °C,将导致扩增效率降低,使阳性反应无法在说明书规定的时间内达到典型的天蓝色。

5. 结果判断

63 °C反应60 min后,立刻取出反应管,放于室温。在光线良好的环境中观察反应结果(建议以白纸为背景)。如果反应液仍为蓝紫色,则判定为阴性;若反应液为天蓝色,则判定为阳性。

【注】:在63 °C反应的时间必须准确计时,超过说明书规定的反应时间可能会出现假阳性。反应管不可开盖,否则会出现气空气中支原体污染反应,出现假阳性的现象。

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HB191121

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