注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

土壤有效硼测试盒测定意义

土壤中有效硼直接影响着植物的吸收和利用。

测定原理

硼与甲亚胺在弱酸条件下形成棕黄色配合物，在 420nm 有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、常温离心机、震荡仪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板。

试剂组成和配制

试剂一：液体 1mL×1 支，4℃保存。

试剂二：液体 8mL×1 瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加 4mL 蒸馏水溶解。

样本处理

新鲜土样风干，过 100 目筛，按照土壤质量（g）：蒸馏水体积（mL）为 1：2 的比例（建议

称取约 0.5g 土样，加入 1mL 蒸馏水）加入蒸馏水，沸水中浸提 10min，待自然冷却，加入

50μ L 试剂一，震荡 5min，8000g ，25℃离心 10min，取上清液待测。

测定操作表

空白管 测定管

样本（μL） 40

试剂二（μL） 80 80

试剂三（μL） 40 40

H2O（μL） 80 40

充分混匀，25℃黑暗中静置 1h

于微量石英比色皿/96 孔板，蒸馏水调零，测定 420nm 处吸光值 A，分别记为 A 空白

管和 A 测定管，△A=A 测定管-A 空白管

计算公式

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线：y = 0.3897x - 0.2359，R² = 0.9995

全硼含量（mg/kg）=（△A+0.2359）÷ 0.3897×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）

 = 51.32×（△A+0.2359）÷W

V 反总：反应总体积，0.2mL；V 样：反应体系中加入样本体积，0.04mL；V 样总：加入提

取液体积，4mL，W：样本质量，g

b. 用 96 孔板测定的计算公式如下

标准曲线：y = 0.1949x - 0.2359，R² = 0.9995

全硼含量（mg/kg）=（△A+0.2359）÷ 0.1949×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）

 =102.64×（△A+0.2359）÷W

V 反总：反应总体积，0.2mL；V 样：反应体系中加入样本体积，0.04mL；V 样总：加入提

取液体积，4mL，W：样本质量，g

注意事项

1. 配制好的试剂二 4℃保存不可超过 7 天。

2. 显色时严格控制温度并且避光，以免显色剂见光分解。