铜蓝蛋白含量测试盒
产品名称: 铜蓝蛋白含量测试盒
英文名称: Ceruloplasmin Activity Colorimetric Kit
产品编号: YS29246
产品价格: 0
产品产地: 中国
品牌商标: 雅吉生物
更新时间: null
使用范围: null
- 联系人 :
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注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
铜蓝蛋白含量测试盒测定意义:
铜蓝蛋白是血浆的含铜蛋白,有运输铜的功能,同时具有氧化酶的活性,是细胞外液重要的
抗氧化剂。
测定原理:
铜蓝蛋白催化 3,3’,5,5’-四甲基联苯胺生成蓝色产物,在 645nm 处有特征吸收峰,依此可得
铜蓝蛋白活性。
自备实验用品及仪器:
天平、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 10mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 7mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 15mL×1 瓶,4℃避光保存。(使用前 37℃预热)
测定操作表:
1、 分光光度计/酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 645nm,蒸馏水调零。
2、 操作表
空白管 测定管
样品(µL) 30 30
试剂一(µL) 90 90
试剂二(µL) 60
混匀,37℃预热 5min
试剂三(µL) 120 120
混匀,37℃反应 30min
试剂二(µL) 60
混匀,25℃室温放置 5min,取 200µL 于微量石英比色皿/96 孔板中,测定 645nm 处吸光值。
ΔA=A 测定-A 空白。
计算公式:
酶活定义:37℃条件下, 每分钟每毫升样品与底物作用吸光度升高 0.01 为一个酶活单位。
Cp 活力(U/mL)=ΔA×V 反总÷0.01÷V 样÷T = 33.33×ΔA
V 样:0.03 mL;V 反总:0.3 mL;T:反应时间,30min
注意事项:
试剂二和试剂三有一定的毒性和刺激性,请操作时做好防护措施