注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

铜蓝蛋白含量测试盒测定意义:

铜蓝蛋白是血浆的含铜蛋白，有运输铜的功能，同时具有氧化酶的活性，是细胞外液重要的

抗氧化剂。

测定原理:

铜蓝蛋白催化 3,3’,5,5’-四甲基联苯胺生成蓝色产物，在 645nm 处有特征吸收峰，依此可得

铜蓝蛋白活性。

自备实验用品及仪器:

天平、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体 7mL×1 瓶，4℃保存。

试剂三：液体 15mL×1 瓶，4℃避光保存。（使用前 37℃预热）

测定操作表:

1、 分光光度计/酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 645nm，蒸馏水调零。

2、 操作表

空白管 测定管

样品（µL） 30 30

试剂一（µL） 90 90

试剂二（µL） 60

混匀，37℃预热 5min

试剂三（µL） 120 120

混匀，37℃反应 30min

试剂二（µL） 60

混匀，25℃室温放置 5min，取 200µL 于微量石英比色皿/96 孔板中，测定 645nm 处吸光值。

ΔA=A 测定-A 空白。

计算公式:

酶活定义:37℃条件下， 每分钟每毫升样品与底物作用吸光度升高 0.01 为一个酶活单位。

Cp 活力（U/mL）=ΔA×V 反总÷0.01÷V 样÷T = 33.33×ΔA

V 样：0.03 mL；V 反总：0.3 mL；T：反应时间，30min

注意事项:

试剂二和试剂三有一定的毒性和刺激性，请操作时做好防护措施