肠出血性大肠杆菌(O157:H7)检测试剂盒(荧光型)上海雅吉生物科技有限公司

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性能参数

产品名称: 肠出血性大肠杆菌(O157:H7)检测试剂盒(荧光型)
英文名称: R buffer
产品货号: YS29255
产品规格: T25
试剂级别: 细胞培养级
产品产地: 中国
产品商标: 雅吉生物
价    格: 询价元
保存与运输: 室温
现货状态: 1000瓶
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2021/1/28 10:53:00
浏览人数:18
诚信指数:661点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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上海雅吉生物科技有限公司
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上海·上海
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产品详细描述

【用途】
 
本试剂盒用于肠出血性大肠杆菌(O157:H7)检测。
 
【原理概述】:
 
肠出血性大肠杆菌(O157:H7)检测试剂盒(荧光型)利用重组酶和单链结合蛋白等酶在39 ℃恒温下进行核酸扩增;并利用核酸外切酶切割根据模版设计的特异性分子探针,使荧光监测设备能实现对目标片段扩增过程的实时***。
 
【产品特点】:
 
肠出血性大肠杆菌(O157:H7)检测试剂盒(荧光型)具有灵敏度高、特异性强、反应时间短(仅需20 mins)等优点,反应组分为干粉状态,操作简便,易于保存。
 
可适用于各种品牌的荧光定量PCR仪、恒温荧光扩增仪器等荧光检测设备。

【包装规格】:

48反应/

【试剂盒成分】

组成

含量

R buffer

1.2 mL×2

B buffer

150μL×1

试剂

48

使用说明书

1

【储存条件及有效期】

储存条件:储存温度≤ -20 oC,避光保存,避免重压、反复冻融;产品有效期:12个月。

【操作步骤】

1.试剂准备(在试剂准备区进行)

1.1取出包装盒中的各组分(冻干粉除外),室温放置,待其温度平衡至室温后,混匀后瞬时离心备用。

1.2根据待测样本,阴性对照,阳性对照的数量装备冻干粉,每个干粉反应管加入45 μL R buffer (注意:R buffer需完全融化混匀,否则会对实验效果产生影响);

2样本加样(在样本处理区进行)

2.1向反应管中加入2.5 μL核酸模板(正对照反应请加入试剂盒提供的2.5 μL正对照模板);

2.2每个反应管加入2.5 μL B buffer, 盖好管盖(对于多个反应,建议将B buffer加至反应管的盖子内侧);上下颠倒反应管8-10次充分混合,混匀后,将反应液甩(或快速离心)至管子底部,转移至扩增区。

核酸扩增(在扩增区进行,请参照各仪器说明书进行设置)

3.1 将反应管放入荧光检测设备中并记录样本放置顺序。荧光检测程序设置为:恒温39 oC;每30 s采集一次FAM通道荧光值,共40个循环;反应时间20 mins。

注:如使用ABI系列PCR仪,请务必于passive referencequencher处均选择“none”

【结果判读】

1. 建议使用我公司推荐的恒温荧光扩增仪(WL-1.

阳性判断:有 “S”型扩增曲线,机器显示结果为“+”

阴性判断:无 “S”型扩增曲线,机器显示结果为“-”

注:当受样本颜色或其他因素影响,显示结果为“+”但并无 “S”型扩增曲线时,结果依然判定为阴性。

2. 使用荧光定量PCR设备时请在确定扩增过程中有类似“S”型扩增曲线时,结合以下原则进行判读,若无则判定为阴性:

序号

通道

Ct

结果判断

1

FAM

UNDET40

样本低于检测限,报告为阴性

2

FAM

≤37

报告为阳性

3

FAM

37-40

复检一次,如仍为37-40,则报告为阴性

【注意事项】

1.  由于试剂盒灵敏度非常高,在进行反应时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。为了防止污染,实验需要分区操作。

2.  实验过程中穿戴工作服和一次性手套,操作中产生的所有废弃物及时处理。

3.  试剂盒保质期12个月。每次使用时,请取出实验所需的反应单元的数量,置于冰浴条下并在8小时内使用;剩余部分,请置于存储条件下。

 

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