UCF·METMT7 RNA Polymerase GMP-grade(1 KU/μL)翌圣生物科技(上海)有限公司

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性能参数

产品名称: UCF·METMT7 RNA Polymerase GMP-grade(1 KU/μL)
英文名称: UCF·METMT7 RNA Polymerase GMP-grade(1 KU/μL)
产品货号: 10613ES92
产品规格: 10 KU
产品产地: Yeasen
产品商标: Yeasen
价    格: 1955元
保存与运输: 干冰运输。-20℃保存,有效期一年。
现货状态: 现货
产品资料: 资料下载
更新时间: 2021/2/9 16:49:00
浏览人数:17
诚信指数:1135点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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产品详细描述

UCF·METMT7 RNA Polymerase GMP-grade1 KU/μL

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

UCF·METMT7 RNA Polymerase GMP-grade(1 KU/μL)

10613ES92

10 KU

1955

10613ES97

50 KU

8655

10613ES98

500 KU

74855

产品描述

本产品是大肠杆菌重组表达来源的噬菌体T7 RNA聚合酶,以含有T7启动子序列(5’-TAATACGACT CACTATAG*-3’)的双链DNA为模板,以NTP为底物,合成与启动子下游的反向单链DNA互补的RNA。双链线性平末端或5’突出末端DNA均可作为T7 RNA聚合酶的底物模板,因此线性质粒、PCR产物均可用作体外合成RNA的模板。

注:G*RNA转录的第一个碱基。

本品是按照GMP工艺要求生产,产品以无菌液体形式提供。 

产品性质

来源(Source

重组E. coli

最适温度(Optimum Temperature

37℃

宿主核酸残留

<1fg/U

宿主蛋白残留

<50ppm

病原体(HBV/ HCV/HIV)检测

无检出

RNA酶残留

阴性

内毒素残留

<0.05EU/1000U

支原体检测

无检出

无菌检测

无检出

储存缓冲液(Storage Buffer

20 mM Tris-HCl pH 8.0100 mM NaCl1 mM DTT0.1 mM EDTA0.1% Triton X-10050%甘油

活性单位定义(Unit Definition

37℃pH8.0 的条件下,1h内使 1 nmol [3H] GMP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。

注:具体产品质检数据及更多指标请查看批次质检报告

产品组分

编号

组分

 

产品编号/规格

10613ES92(10 KU)

10613ES97(50 KU)

10613ES98(500 KU)

10613-A

T7 RNA polymerase (1 KU/μL)

10 μL

50 μL

500 μL

10613-B

10×Transcription Buffer

100 μL

500 μL

1 mL×5

注:10×Transcription Buffer中含60 mM MgCl2100 mM DTT,但不含有NTP,如需请购买本公司NTP set solution 10133

产品应用

1. 单链 RNA合成(包括mRNAsiRNAgRNA等各类RNA前体,以及同位素标记或非同位素标记的RNA探针)

2. 以(Cap analog)为引物合成Capped mRNA 

运输储存方法

干冰运输。-20℃保存,有效期一年

应用实例

1按下列体系配制反应体系

组分

体积(μL

终浓度

10×Transcription Buffer (Mg2+ Plus)

2

CTP / GTP/ ATP/ UTP (100 mM each)

0.4 each

2 mM each

T7 RNA Polymerase (1 KU/μL)

0.5-1

-

RNase inhibitor (40 U/μL)

1

-

RNase free H2O

Up to 18

-

模板DNA

2 (100 ng-1μg)

-

注: 1. DNA模板需要最后加入。由于10×Buffer中含有亚精胺,亚精胺浓度过高会引起DNA模板沉淀。

     2. Buffer和水建议放置到室温,然后开始使用,反应于室温下配制,防止温度低引起亚精胺沉淀高浓度DNA模板。

     3.若转录长度< 100 nt,模板投入量可增加至2μg

4. RNase inhibitor (40 U/μL)请购买本公司产品10603

5.为了特定区域的有效转录,建议在其区域下游把模板DNA预先切成平端或5′突出末端。

237℃反应1-2 h(若转录长度≤ 100 nt,增加时间至4-8h)。

3反应结束后,使用2U DNaseⅠ(无RNase37℃15 min去除DNA模板。

4转录产物纯化体外转录产物可选用RNA Cleaner磁珠进行纯化(12602),以去除蛋白、盐离子和其他杂质。也可以采用酚/氯仿纯化法(具体操作步骤可联系Yeasen索取)。

注意事项

1DNA模板的种类:推荐使用含T7启动子的线性化质粒和PCR产物作为模板。

2转录模板的纯度会显著影响体外转录反应。在质粒DNA抽提过程中残留的RNase A会显著影响转录RNA的质量。通过酚-氯仿抽提的质粒DNA为最佳模板;PCR产物建议采用胶回收纯化后使用。

320 μL反应体系中加入0.02U热稳定无机焦***酸酶可显著提高转录产量。

4为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

HB210209

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