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Portelite 荧光总核酸定量试剂盒 *针对 Cytocite 和 Qubit 荧光计进行了优化*西安百萤生物科技有限公司

银牌供应商

性能参数

产品名称: Portelite 荧光总核酸定量试剂盒 *针对 Cytocite 和 Qubit 荧光计进行了优化*
产品货号: 17631
产品规格: 200 Tests
产品产地: 美国
产品商标: AAT Bioquest
价    格: 面议元
现货状态: 现货
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2021/7/15 17:02:00
浏览人数:3
诚信指数:1252点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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西安百萤生物科技有限公司
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产品详细描述

 简要概述

Portelite 荧光总核酸定量试剂盒用于快速测量核酸总量,包括样品中的双链 DNA (dsDNA)、单链 DNA (ssDNA) 和 RNA。 该试剂盒包含所有基本试剂,包括 Helixyte Green ssDNA 试剂、稀释缓冲液和预稀释的 DNA 标准品。 Helixyte Green All 试剂是一种灵敏的荧光核酸探针,用于测量样品中可能含有双链 DNA (dsDNA)、单链 DNA (ssDNA)、RNA 和长寡核苷酸的核酸总量。 Helixyte Green All 试剂不加选择地与 dsDNA、ssDNA 和 RNA 结合。 Portelite 荧光总核酸定量试剂盒针对使用 CytoCite 或 Qubit® 荧光计测量核酸总量进行了优化。

 

适用仪器


荧光定量仪 
激发:480nm
发射:530nm
材料:0.2 毫升 PCR 管
CytoCite 荧光计 
激发:480nm
发射:530nm
材料:0.2 毫升 PCR 管


产品说明书

实验方案

概述

1.准备 Helixyte Green All 工作溶液
2.在每个 0.2 mL PCR 管中加入 190 μL 1X Helixyte Green All 工作溶液
3.在每管中加入 10 μL 核酸标准品或测试样品
4.在室温下孵育 2 分钟
5.使用 CytoCite 荧光计或 Qubit 荧光计检测荧光强度

 

溶液制备

Helixyte Green ALL工作溶液
1.用检测缓冲液(组分 B)将 Helixyte Green All 试剂(组分 A)稀释 200 倍。 例如,要为 5 个样品制备足够的工作溶液,将 5 μL Helixyte Green All(组分 A)添加到 1 mL 检测缓冲液(组分 B)中。
注意:通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。 建议在塑料容器而不是玻璃容器中制备溶液,因为染料可能会吸附到玻璃表面。 为获得最佳效果,该溶液应在稀释后几小时内使用。

 

操作步骤 

样品体积的可接受范围是 1~20 μL,具体取决于核酸样品的估计浓度。
以下方案是基于 10 μL 的样品体积生成的。
1.将 190 μL 1X Helixyte Green All 工作溶液添加到每个 Cytocite 样品管 (#CCT100) 或等效的 0.2 mL PCR 管中。
注意 使用薄壁、聚丙烯、透明的 0.2 mL PCR 管,例如 AAT Cat#CCT100。
2.每管加入10 μL核酸标准品或测试样品,涡旋2~3秒混匀。
3.在室温下孵育所有管子 2 分钟。
4.将样品插入 CytoCite 或 Qubit 并使用绿色荧光通道检测荧光强度。

 

标准校准曲线的制作
对于 Portelite 检测,您可以选择使用核酸标准品制作校准曲线。 这是生成定制 DNA 标准曲线的简要方案。
1.进行 1:2 连续稀释:将 10 ng/μL 核酸标准品 #2(组分 D)添加到检测缓冲液(组分 B)中以获得 10、5、2.5、1.25、0.62、0.31、0.15 ng/μL DNA 标准品 稀释。
2.将 190 μL Helixyte Green All 工作溶液加入每个管中。
3.将 10 μL 标准品加入 0.2 mL PCR 管中,然后涡旋混合 2~3 秒。
4.在室温下孵育反应 2 分钟。
5.将样品插入 CytoCite 并使用绿色荧光通道检测荧光强度。

 

图示

图 1. 使用 Qubit 荧光计(蓝色)或 CytoCite 荧光计(红色)比较总核酸剂量反应。

 

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