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UltraNuclease ELISA Kit全能核酸酶检测试剂盒翌圣生物科技(上海)股份有限公司

银牌供应商

性能参数

产品名称: UltraNuclease ELISA Kit全能核酸酶检测试剂盒
英文名称: UltraNuclease ELISA Kit全能核酸酶检测试剂盒
产品货号: 36701ES59
产品规格: 1 Kit(96 Tests)
产品产地: Yeasen
产品商标: Yeasen
价    格: 7685元
保存与运输: 冰袋(wet ice)运输。4℃保存,未开包装的产品,一年有效。试剂打开后,有效期1个月。
现货状态: 现货
产品资料: 资料下载
更新时间: 2021/7/21 10:23:00
浏览人数:3
诚信指数:1199点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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供应商联系卡

翌圣生物科技(上海)股份有限公司
地址:
上海市浦东新区天雄路166弄一号楼三层南单元
邮编:
200030
电话:
400-6111-883、021-34615995-8075
传真:
021-34615995-188
联系人:
李自转
所在区域:
上海·浦东新区
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产品详细描述

 ltraNuclease ELISA Kit全能核酸酶检测试剂盒

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

UltraNuclease ELISA Kit全能核酸酶检测试剂盒

36701ES59

1 Kit96 Tests

7685

产品描述

UltraNuclease(全能核酸酶),又称非限制性核酸内切酶、广谱核酸酶;是一种来源于Serratia Marcescen的非特异性核酸内切酶,可在链内任意核苷酸间进行切割,将核酸完全消化成2-5个碱基长度的5-单***酸寡核苷酸,能够在非常广泛的条件下(6 M Urea0.1 M Guanidine HCl0.4% Triton X-1000.1% SDS1 mM EDTA1 mM PMSF)降解各种形式的(双链,单链,线状,环状,天然或变性)DNARNA,广泛用于去除生物制品中的核酸。后续也可以通过相应的方法对其进行去除UltraNuclease

本试剂盒应用双抗体夹心酶联免疫检测(夹心 ELISA)原理检测变性与非变性的UltraNuclease全能核酸酶的残留,用抗UltraNuclease的兔多克隆抗体包被微孔板,形成固相抗体,向固相抗体微孔板中加入UltraNuclease标准品和待测样品,然后加入生物素(Biotin)标记的Anti-UltraNuclease多抗,最后加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(SAHRP),形成抗体+ 抗原+抗体‐Biotin+ SAHRP 复合物,经过洗涤后加入 TMB 底物显色;TMB HRP 酶的催化下转化成蓝色并在酸的作用下最终转换成黄色,颜色的深浅与样品中UltraNuclease的量呈正相关。本试剂盒的检测范围0.047-3 ng/mL;检测下限:23.5pg/mL

运输与保存方法

冰袋(wet ice)运输。4℃保存,未开包装的产品,一年有效。试剂打开后,有效期1个月。千万不可冻存。

配置好的试剂保存时间:1稀释后的洗涤缓冲液和稀释缓冲液,4℃保存,有效期1周;2标准品36701-C为液体,保存于4℃,有效期1年;3配制好的检测抗体终止缓冲液,4℃保存有效期1个月。

注意事项

1试剂盒需在保质期内使用完毕。

2禁止不同批次的相关试剂进行混用。

3本产品仅能够应用于检测说明书中标注的靶点抗原与样本。其它应用需经使用者设计验证后,根据结果评估使用的可靠性与准确性。

4本产品仅用于研究,不能用于临床诊断或治疗。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

产品组分

组分编号

组分名称

规格

36701-A

酶标板

1 Plate

36701-B

Detection AntibodyBiotin-conjugated Rabbit Anti-UltraNuclease Antibodies

35 μL0.2 mg/mL

36701-C

Standard: UltraNuclease

1 vial500 ng/mL

36701-D

HRP-conjugated Streptavidin

10 μL

36701-E

Dilution Buffer 1

30 mL

36701-F

10 × Wash Buffer

50 mL

36701-G

Dilution Buffer 2

30 mL

36701-H

TMB

10 mL

36701-I

Stop Solution

10 mL


使用说明:

、试剂准备

使用前所有试剂组分以及待测样本需要恢复室温。

1. 1×Wash Buffer配制:浓缩液平衡至室温,充分溶解,不要有结晶。混匀,取50 mL 10×Wash Buffer至超纯水中,然后定容到500 mL;具体配制体积,可按照每次使用量进行配制。

2. Detection Antibody配制:使用前10000 r离心20 s,然后用Dilution Buffer 2将检测抗体稀释至工作液浓度0.5 μg/mL

3. HRP-conjugated Streptavidin配制:使用前10000 r离心20s然后用Dilution Buffer 215000稀释至工作浓度使用。 

4. 标准品曲线的配制:准备8个无菌的1.5 mL离心管,按照标准品浓度依次进行标记。移取994 μL Dilution Buffer 1至标记为3 ng/ml的离心管中,其余各管移取500μL根据标准品储存液浓度计算3 ng/ml标准品应移取的储液体积,加至离心管中混匀,取500 μL至下一个标记浓度的离心管中,混匀,进行一系列2倍梯度稀释标品,起始最高浓度标记3 ng/mL,最低浓度为0.047 ng/mL,可按照下面的配制方法来进行。每次试验均需制备相应的标准曲线,不同试剂盒以及不同时间的标准曲线不能混用。样本测试时,每个孔所需标品量为100 μL,注意配制体积要高于所需体积,避免体积使用量不足。

1 UltraNuclease标准品体系配制(酶标仪检测0.047-3 ng/mL*

Vial

Dilution Buffer 1μL

500 ng/mL UltraNuclease标准品体积(μL

标准品终浓度(ng/mL

A

994

6

3

B

500

500 A

1.5

C

500

500 B

0.75

D

500

500 C

0.375

E

500

500 D

0.188

F

500

500 E

0.094

G

500

500 F

0.047

H

300

0

0=Blank

二、实验方法

使用前所有试剂组分以及待测样本需要恢复室温。强烈建议所有的标准品和待检样本进行双复孔测定

1.试剂准备:备好各种待测试剂、稀释好的标准品和待测样本。

2.标条确定计算待测样本和标准品所需酶标条,将酶标条从铝箔袋取出,剩余的酶标条放回铝箔袋中并封好袋口,低温保存。

3.清洗酶标:用1×Wash Buffer 300 μL/洗板三次,拍干酶标板。洗板对试验结果有重要影响,确保最后一次拍板没有洗液残留。

4.孵育样本:加入标准品和待测样本,100 μL/确保15 min内完成点样,37孵育1 h

5.清洗酶标:弃去孔中液体,加入1×Wash Buffer300 μL/洗板次,拍干酶标板。

6. Biotin-conjugated检测抗体孵育:将预先配制至工作浓度的检测抗体加入酶标板中,100 μL/孔,37孵育1 h

7.清洗酶标:弃去孔中液体,加入1×Wash Buffer300 μL/洗板五次,拍干酶标板。

8. HRP-conjugated Streptavidin孵育将预先配制至工作浓度的偶联HRP亲和素加入酶标板中,100 μL/孔,37孵育40 min

9.清洗酶标弃去孔中液体,加入1×Wash Buffer300 μL/洗板次,拍干酶标板。

10.显色:使用前10 min底物液恢复至室温,将底物液TMB加入酶标板中,100 μL/孔,37避光孵育15 min

11.终止:加入50 μL/孔终止液至酶标板中,轻轻震动酶标板至显色均匀。

12.读值20 min内读取450 nm的光吸收值。

、结果分析

1. 如果待测样本OD值超出标准曲线最高点OD值,需将样本进行稀释后重新测定。

2. 曲线制定:根据UltraNuclease全能核酸酶标准品的吸光度(减去标准品中空白孔的OD值即最终的读数,也可以不用减去空白孔的OD值)采用二次曲线回归拟合,绘制标准曲线(X-标准品浓度ng/mLY-最终的OD450 nm),推荐使用ELISACalc.exe回归/拟合计算软件。依据标准曲线和样品的稀释倍数计算样品中全能核酸酶浓度。


附件1:标准品配置流程简图

 

附件2:示例数据

以下标准曲线图仅供参考,应以同次实验标准品所绘标准曲线计算标本含量

 

 



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