一个合格TaggedCap质粒的组成要素 复制起始位点Ori，即控制复制起始的位点。原核生物DNA 分子中只有一个复制起始点。而真核生物DNA 分子有多个复制起始位点。 抗生素抗性基因：可以便于加以检测，如Amp+ ，Kan+ 多l 克隆位点：MCS 克隆携带外源基因片段 P/E：启动子/增强子 Terms：终止信号 加poly（A）信号：可以起到稳定mRNA 作用。

TaggedCap质粒选择主要考虑下述3点：

1、构建DNA 重组体的目的，克隆扩增/表达表达，选择合适的克隆载体/表达载体。

2、载体的类型： （1）克隆载体的克隆能力－据克隆片段大小（大选大，小选小）。如小于10kb 选质粒。 （2）表达载体据受体细胞类型－原核/真核/穿梭，E.coli/哺乳类细胞表达载体。 （3）对原核表达载体应该注意3点。

3、TaggedCap质粒 MCS 中的酶切位点数与组成方向因载体不同而异，适应目的基因与载体易于链接，不产生阅读框架错位。选用质粒（最常用）做载体的4点要求： ①选分子量小的质粒，即小载体（1－1.5kb）→不易损坏，在细菌里面拷贝数也多（也有大载体）； ②一般使用松弛型质粒在细菌里扩增不受约束，一般10个以上的拷贝，而严谨型质粒小于10个。 ③必需具备一个以上的酶切位点，有选择的余地； ④必需有易检测的标记，多是抗生素的抗性基因，不特指多位Ampr（试一试）。 无论选用哪种载体，首先都要获得载体分子，TaggedCap质粒然后采用适当的限制酶将载体DNA 进行切 割，获得分子，以便于与目的基因片段进行连接。XY100844PCR优化试剂盒1套XY90302氯化锰溶液，PCR级5mLXY70905明胶溶液，2%，PCR级1.5mLXY61203高GC DNA清除剂，PCR级1.5mLXY130307二氯化锰溶液，25mM，PCR级5mLXY130840硫酸镁溶液，10mM，PCR级5mLXY130841石蜡油，PCR级10mLXY80205DMSO，PCR级1.5mLXY130506海藻糖溶液，1.5M，PCR级1.5mLXY70902甜菜碱溶液，5M，PCR级1.5mLXY70909绿如蓝染料，PCR级0.1mL|1mLXY51208dNTP溶液，10 mM0.5mL(B)|5mL(B)XY131038dUTP溶液，100 mM0.4mLXY130920dITP溶液，100mM0.5mLXY120615dATP溶液，100mM0.5mLXY120617dTTP溶液，100mM0.5mLXY120619dGTP溶液，100mM0.5mLXY130917dCTP溶液，100mM0.5mLXY131139Deaza dGTP溶液，5mM0.4mLXY131140双脱氧dNTP溶液，10mM40uL×4XY131141dNTP和引物清除剂100次XY131212PCR Mix染料10mLXY60901可逆型Taq DNA聚合酶抑制剂0.3mLXY130815Taq酶抗体250U|1000UXY130601DNA 修复混合液30次|150次XY70802即用型PCR试剂盒2.0100次|600次XY90805即用型PCR试剂盒3.0100次|600次XY130986即用型热启动PCR 试剂盒1.5次XY130985免DNA提取PCR试剂盒100次XY101005即用型易错PCR试剂盒100次XY90702即用型长片段PCR试剂盒20次XY90708即用型高保真PCR试剂盒1.5mL|9mLXY130605即用型多重 PCR试剂盒50次XY90408即用型荧光定量PCR试剂盒100次|600次XY130816Real-Time PCR稀释液1mlXY130817ROX参考染料，高浓度型200μlXY100931ROX参考染料，低浓度型5μgXY60906cDNA第一链合成试剂盒10次|50次XY130911miRNA cDNA第一链合成试剂盒25次XY131042miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒25次XY131005cDNA第二链合成试剂盒30次XY130308一管式双链cDNA合成试剂盒10次XY100814Oligo dT12-18引物5μgXY1004096 nt随机引物5μgXY13122710 nt随机引物5μgXY1206796nt随机引物(抗水解)100μLXY80206两管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq)50次XY91202双酶一管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq)50次XY130609一步式RT-PCR Mix1mLXY130957免RNA提取RT-PCR试剂盒100次XY101219即用型荧光定量RT-PCR试剂盒50次XY100941通用型全基因组扩增试剂盒30次XY100938单细胞全基因组扩增试剂盒30次XY100940石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒30次XY100942单孢子全基因组扩增试剂盒30次XY100947环状DNA全基因组扩增试剂盒30次XY100203通用型LAMP试剂盒50次XY101114通用型RT-LAMP试剂盒50次XY130923LAMP扩增阳性对照50次XY130833LAMP可见光染料1mLXY131179核酸稀释液，测OD专用100mLXY131083Ribo-SPIA cDNA 扩增试剂盒20次XY91106T7体外转录试剂盒50次(A)|50次(B)XY91107SP6体外转录试剂盒50次(A)|50次(B)XY91108T3体外转录试剂盒50次(A)|50次(B)XY130694m7G(5′)ppp(5′)G 帽结构类似物25ODXY130695m7G(5′)ppp(5′)A 帽结构类似物25ODXY130696G(5′)ppp(5′)A 帽结构类似物25ODXY130697G(5′)ppp(5′)G 帽结构类似物25ODXY1306983′-O-Me-m7G(5′)ppp(5′)G 帽结构类似物25ODXY70906NTP溶液，10 mM0.5mLXY120625ATP溶液，100mM0.25mLXY120626UTP溶液，100mM0.25mLXY120628GTP溶液，100mM0.25mLXY120627CTP溶液，100mM0.25mLXY130832通用型MLPA试剂盒20次XY130551单细胞RNA扩增试剂盒80次XY130803单细胞裂解液(DNA)1mLXY130804单细胞裂解液(RNA)1mLXY130805单细胞悬浮液1mLXY130806胚胎裂解液1mLXY131128动物种属鉴定PCR Mix100次XY131129植物种属鉴定PCR Mix100次XY131130真菌种属鉴定PCR Mix100次XY131131细菌种属鉴定PCR Mix100次XY30常用PCR引物100uL

基因结构和功能

XY100212 一管式点突变试剂盒 10次

XY130823 多点突变试剂盒 20次

XY100213 DNA嵌套缺失试剂盒 10次

XY100922 亚硫酸氢盐DNA修饰试剂盒 50次