Origami B (DE3)化学感受态-细胞株/菌种-试剂-生物在线
Origami B (DE3)化学感受态

Origami B (DE3)化学感受态

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产品名称: Origami B (DE3)化学感受态

英文名称: Origami B (DE3) Chemically Competent Cell

产品编号: HZ0044

产品价格: 0

产品产地: 中国/美国

品牌商标: HZbscience

更新时间: 2023-08-17T10:24:20

使用范围: null

上海沪震实业有限公司
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Origami B (DE3)化学感受态使用说明
1、本产品采用干冰运输,收到后请直接冻存于-80℃冰箱。
2、取冻存于-80℃的100μl感受态细胞于冰上融化;
3、加入1μl纯质粒,轻轻吹打混匀,冰浴30min;
4、将菌液放入42℃水浴中热激45sec,立即放入冰浴中2min;
5、加入900μl SOC/LB培养基,于37℃恒温摇床上150rpm×45min温育;
6、将菌液5000rpm×5min离心,弃尽上清;
7、取100μl新鲜LB培养基将菌体打散,均匀涂布于对应抗性平板表面;
8、平板可先正向37℃放置1h,待液体吸收完毕,再倒置37℃培养过夜。

Origami B (DE3)化学感受态基因型
F- ompT hsdSB(rB- mB-gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522:: Tn10 trxB (KanR, TetR)

Origami B (DE3)化学感受态菌株介绍
Origami B系列菌株同样具有Origami系列菌株含有的trxB/gor基因突变,但是该菌株是来源于BL21的lacZY基因突变株。所以,Origami B系列感受态细胞是集合BL21,Tuner和Origami三种细胞株的优点于一身。
在thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)基因上同时含有突变,这使得该菌株能够更加高效的在细胞质内生成二硫键,有助于含二硫键蛋白的活性蛋白形成。
TrxB和Gor基因突变使得质粒能够分别具有卡那和四环素抗性,所以本菌株无法用于卡那和四环素抗性质粒的蛋白表达。
Origami B(DE3)感受态细胞来源于含有lacZY基因突变的BL21菌株,能够通过IPTG高效控制目的基因的表达。
形成二硫键,促溶蛋白

Origami B (DE3)化学感受态注意事项
1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、本产品仅可用于实验室研究,不能用于动物,人体以及作为食品添加剂等用途。
3、混入质粒或连接产物时应轻柔操作,感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
4、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
5、新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
6、涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。