大肠杆菌C600菌种的来源、传代、分离复壮、使用和鉴定等均应该做好详细记录。包括菌种时间、名称、菌号、代数、保存方式、分离复壮方式、使用内容、鉴定情况等。

菌种保藏由于影响因素过多，细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决，因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。      

1. 大肠杆菌C600菌种培养试剂的保存：

   血清：-5oC - -20oC 保存，避免反复冻融。

   培养基:  2oC – 8oC避光保存。

   完全培养基: 2oC – 8oC避光保存，并在2周内用完。

   尽量缩短血清和培养基见光的时间

 2.液体培养基中谷氨酰胺使用方法：

很多细胞生长要求在培养液中添加谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20◦C冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4◦C 冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。大肠杆菌C600菌种另一种选择是使用L-谷氨酰胺的衍生物 - L-alanyl-L-glutamine dipeptide（如GenDepot的产品Glutaplex配方中含有的成分之一） 替代L-谷氨酰胺。Glutaplex与L-谷氨酰胺相比更加稳定，降解比较慢，提高细胞的存活和生长，极大降低对细胞有毒性的氨的积累。

3.培养基中是否应加酚红：

 大肠杆菌C600菌种酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂，中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时紫色。研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用，特别是雌激素。为避免固醇类反应，培养细胞尤其是哺乳类细胞时，应使用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时不使用加酚红的培养基。EC871 MEF 小鼠胚胎成纤维细胞 小鼠 DMEM 贴壁

EC324 Farage 人B淋巴瘤细胞 人 1640 悬浮

EC508 OECI-LY3 弥漫大B细胞淋巴瘤细胞 人 1640 悬浮

EC509 3D4/21 猪肺泡巨噬细胞 猪 DMEM 贴壁

EC464 HEEpiEC 人食管上皮细胞 人 1640 贴壁

EC510 ECP70 人卵巢癌细胞 人 1640 贴壁

EC738 KYSE450 人食管癌细胞 人 EMEM 贴壁

EC511 BNL1MEA.7R.1 小鼠肝上皮细胞 小鼠 1640 贴壁

EC512 HECEC-78 人肺腺癌细胞 人 IMDM 贴壁

EC1170 SHEE 永生化食管上皮细胞 人 1640 贴壁

EC306 EECV304 人脐静脉内皮细胞 人 1640 贴壁

EC537 HM 人小神经胶质细胞 人 DMEM 贴壁

EC513 ECTV-1 人类T细胞白血病细胞 人 1640 悬浮

EC520 GDM-1 人急性粒细胞白血病细胞 人 IMDM 悬浮

EC514 DOhh2 人胸腔积液滤泡中心母细胞 人 1640 悬浮

EC515 HBE 人支气管上皮样细胞 人 DMEM 贴壁

EC762 LADMAEC 小鼠骨髓淋巴细胞 人 DMEM 悬浮

EC521 EOEC20 小鼠小胶质细胞 小鼠 DMEM 贴壁

EC517 A2058 人黑色素瘤细胞 人 DMEM 贴壁

EC522 BMSECs 小鼠骨髓间充质干细胞 小鼠 DMDM 贴壁

EC635 HuECECT1 人胆管上皮癌细胞 人 DMEM 贴壁

EC636 huh28 人胆管癌细胞 人 1640 贴壁

EC1286 TE354.T 人皮肤基底细胞癌细胞 人 DMEM 贴壁

EC518 NECI-H820 人乳头状肺腺癌 人 1640 贴壁

EC519 ECAOV-3 人乳突状卵巢腺癌细胞 人 DMEM 贴壁

EC523 HSMEC 人骨骼肌细胞 人 DMEM 贴壁