(PAL)测试盒 (紫外分光光度法)
产品名称: (PAL)测试盒 (紫外分光光度法)
英文名称: none
产品编号: BC0210
产品价格: 0
产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三
品牌商标: solarbio
更新时间: 2023-08-11T10:26:26
使用范围: null
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苯丙氨酸解氨酶(PAL)测试盒
品牌:Solarbio | 货号:BC0210
- 检测方法 : 紫外分光光度法
商品货号: | 商品品牌: | 规格 | 基本售价: | 选择规格 |
---|---|---|---|---|
BC0210-50管/48样 | Solarbio | 50管/48样 | 800元 |
测定意义:PAL(EC4. 3 1 5)广泛存在于各种植物和少数微生物中,是植物体内苯丙烷类代谢的关键酶,与一些重要的次生物质如木质素、异黄酮类植保素、黄酮类色素等合成密切相关,在植物正常生长发育和抵御病菌侵害过程中起重要作用。
测定原理:PAL催化L-苯丙氨酸裂解为反式肉桂酸和氨,反式肉桂酸在290nm处有 大吸收值,通过测定吸光值升高速率计算PAL活性。
试验中所需的仪器和试剂:紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1ml比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
(PAL)测试盒 (紫外分光光度法)说明书
产品内容:
提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 40mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×3 瓶,4℃保存,临用前每瓶加入 4mL 双蒸水充分溶解待用;现配现用。
试剂三:液体 2.5mL×1 瓶,4℃保存;
操作步骤:
一、粗酶液提取:
称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆。10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待 测。
二、测定操作表:
试剂名称 测定管(μL) 对照管(μL)
样本 20
试剂一 780 800
试剂二 200 200
混匀,30℃准确水浴 30min
试剂三 40 40
混匀,静置 10min 后,用对照管调零,290nm 处记录测定管吸光值 A (A=A 测定管-A 对照管)。
三、PAL 活性计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每 mg 组织蛋白在每 ml 反应体系中每分钟使 290nm 下吸光值变化 0.1 定义为一个
酶活力单位。
PAL(U/mg prot)=A×反应总体积(1040μL)÷样本体积(20μL)÷反应时间(30min)÷0.1 ÷蛋白
浓度(mg/mL)=17.3×A÷蛋白浓度(mg/mL)
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义: 每 g 组织在每 ml 反应体系中每分钟使 290nm 下吸光值变化 0.1 定义为一个酶活力
单位。
PAL (U/g 鲜重) =A×反应总体积 (1040μL) ÷z样本鲜重 (g) ×样本体积 (20μL) ÷V 样总 (1mL) {
÷反应时间(30min)÷0.1 =17.3×A÷样本鲜重(g)
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相关文献:
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