无水柠檬酸一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料。不用的培养基的成分不同，但是步骤却大径相同。

培养基的制备方法

      1.配料

无水柠檬酸配方换算→在容器中加入少量水（蒸馏水，自然水）→按照配方称取各种药品（依次加入）→加足所需水量（一药一勺，取药后立即盖上瓶盖）。

      2.溶解

淀粉溶解：少量冷水调成糊状

加热溶解，特别是加有琼脂的培养基，一定要煮沸，琼脂的熔解温度95-97℃ ，且需要边加热边搅拌以防止烧焦。

      3.调PH

用1N的盐酸或1N的 NaOH把培养基调节到所要求的值。

      4.过滤

滤纸或棉花进行过滤。（有时可以省去）

      5.分装

无水柠檬酸一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。

      (1)三角瓶

若作静置培养，则100ml培养基/250ml的三角瓶，最多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶，否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞，造成染菌；若作摇瓶培养，则15-20ml培养基/250ml的三角瓶，保证通气良好。

      (2)试管分装

液体培养基一般装4-5ml，约试管的1/4高度；

固体斜面培养基一般装3-4ml，约试管的1/5高度。

      6.包扎

无水柠檬酸分装好后，塞上棉塞，在用牛皮纸将棉塞包裹好，防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。

      7.灭菌

按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高，营养成分会被破坏，培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。

      8.摆斜面

灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放，使其凝固成为一个斜面，约占试管长度的1/2。

      9.贮存

无水柠檬酸在30℃下放置一天，无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。L-酪氨酸营养琼脂基础 28382 250g 用于蜡样芽孢杆菌的L-酪氨酸分解试验。

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