RIzol的成分:

　　TRIzol的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解细胞，使细胞中的蛋白，核酸物质解聚得到释放。苯酚虽可有效地变性蛋白质，但不能完全抑制RNA酶活性，因此TRIzol中还加入了8－羟基喹啉、异硫*酸胍、β-巯基乙醇等来抑制内源和外源RNase（RNA酶）。

　　※0.1%的8－羟基喹啉可以抑制RNase，与氯仿联合使用可增强抑制作用。

　　※异硫*酸胍属于解偶剂，是一类强力的蛋白质变性剂，可溶解蛋白质并使蛋白质二级结构消失，导致细胞结构降解，核蛋白迅速与核酸分离。

　　※β-巯基乙醇的主要作用是破坏RNase蛋白质中的二硫键。

TRIzol的使用方法:

　　用匀浆器将组织磨碎，加入TRIzol处理组织。5分钟后加入氯仿，以每分钟12000转离心5分钟，样品即分成水样层、中间层和有机层。

　　※RNA存在于水样层中，收集水样层后可以通过异丙醇沉淀RNA来还原。

　　※在除去水样层后，有机层中的DNA和蛋白质也能相继以沉淀的方式还原：乙醇能使中间层的DNA沉淀析出，在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白质。

　　每100ml TRIzol可以抽提100个六孔板中的样品或100个50-80mg的组织样品。无论样品是人、动物、植物还是细菌组织，该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(约五百万个)及大量的组织(≥1g)和细胞(超过一千万个)均有较好的分离效果。

　　每一百万细胞用TRIzol抽提可得5-15微克RNA，每毫克组织用TRIzol抽提可得1-10微克RNA（产量因细胞和组织不同而异）。

　　TRIzol操作上的简便性允许其同时处理多个样品，所有的操作可以在一小时内完成。

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