(单细胞全长mRNA扩增试剂盒)Single Cell Full Length mRNA-Amplication Kit-文库及构建-试剂-生物在线
(单细胞全长mRNA扩增试剂盒)Single Cell Full Length mRNA-Amplication Kit

(单细胞全长mRNA扩增试剂盒)Single Cell Full Length mRNA-Amplication Kit

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产品名称: (单细胞全长mRNA扩增试剂盒)Single Cell Full Length mRNA-Amplication Kit

英文名称: Single Cell Full Length mRNA-Amplification Kit

产品编号: N712-01/02/03

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产品产地: 江苏南京

品牌商标: Vazyme

更新时间: null

使用范围: null

南京诺唯赞生物科技股份有限公司
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模板起始量低:单个细胞或10pg Total RNA即可作为起始模板,进行高效扩增

扩增灵敏度高:使用LNA技术及精心优化的反应体系,提高低表达基因的检出量

产物完整性好:通过双端引物扩增全长cDNA,获得全转录组信息,避免了53偏好性

 

单个293T细胞和10 pg Total RNA分别扩增18个循环,取1 μl纯化后的cDNA扩增产物使用Agilent 2100 Bioanalyzer进行检测,扩增产物分布于400-10000 bp,文库的peak位于2000 bp 左右;无模板阴性对照无产物。

Single Cell Full Length mRNA Amplification Kit能以1-500个细胞或10 pg-10 ng总RNA为模板,以Oligo(dT) VN Primer 为逆转录引物进行cDNA的合成,并且利用逆转录酶Sc Reverse Transcriptase的Template-switching活性在cDNA的3’端添加一段接头序列,通过该接头序列进行后续PCR扩增以获得全长cDNA扩增产物。有效避免了cDNA合成过程中的3’偏好性和rRNA的污染,对获得的全长cDNA扩增产物进行测序分析可以得到基因表达差异、可变剪接、融合基因等遗传调控信息。

Single Cell Full Length mRNA Amplification Kit ,兼容样品体积可控制为2.5 μl。一般情况下,一个反应可以产生2-20 ng的cDNA扩增产物。

 组分N712-01 (12 rxn)N712-02 (24 rxn)N712-03 (96 rxn)
Box 15’ TS Oligo Primer6 μl12 μl48 μl
Control Total RNA (1 μg/μl)5 μl5 μl10 μl
Box 2Lysis Buffer230 μl460 μl2 × 920 μl
RNase Inhibitor30 μl60 μl320 μl
Oligo (dT) VN Primer12 μl24 μl96 μl
dNTP Mix12 μl24 μl96 μl
DTT6 μl12 μl48 μl
1st Strand Buffer24 μl48 μl192 μl
Sc Reverse Transcriptase12 μl24 μl96 μl
2 × Amplification Mix150 μl300 μl2 × 600 μl
PCR Primer6 μl12 μl48 μl
Elution Buffer1 ml1 ml2 × 1 ml
Nuclease-free H2O1 ml1 ml2 × 1 ml

Box 1,-70°C储存;

Box 2,-20°C储存。