4% Paraformaldehyde (with DEPC) 4%多聚甲醛(含DEPC)-蛋白分析-试剂-生物在线
4% Paraformaldehyde (with DEPC) 4%多聚甲醛(含DEPC)

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产品名称: 4% Paraformaldehyde (with DEPC) 4%多聚甲醛(含DEPC)

英文名称: 4% Paraformaldehyde (with DEPC) 4%多聚甲醛(含DEPC)

产品编号: 36315ES76

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产品产地: Yeasen

品牌商标: Yeasen

更新时间: 2023-08-17T13:40:59

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4% Paraformaldehyde (with DEPC)

4%多聚甲醛(含DEPC

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4% Paraformaldehyde (with DEPC)4%多聚甲醛(含DEPC

36315ES76

500 mL

4℃

169.00

产品描述

多聚甲醛(Paraformaldehyde),又称聚缩醛,为甲醛(Formaldehyde)的聚合物。是一种杀菌剂、抗真菌剂。免疫实验中常作为一种固定剂用于细胞或组织样品的固定。在该应用中,发挥固定作用的是单体甲醛,因此,使用前需将多聚甲醛经过加热使之转化为单体甲醛。

本品为4%的多聚甲醛溶液,是一种蛋白交联剂,对组织穿透性好,组织收缩小。且溶液较温和,能很好保存组织的抗原性和细微结构,适用于组织标本和细胞涂片的固定,主要用于免疫细胞化学(ICC)、免疫组织化学(IHC)、免疫电镜等实验。另外,本品使用经DEPC处理的溶液体系(RNase-free)配置的4%多聚甲醛溶液,除了可以做免疫组化实验外,还可以用于原位杂交实验。

运输和保存方法

冰袋运输。4℃避光保存。有效期1年。

使用说明

1.免疫组化

1)组织固定:室温或4℃浸泡固定2-24 h,用缓冲液漂洗后即可树脂包埋用于组织切片。

注:依据切片的厚度来决定固定时间,不要超过24 h

2)切片固定:室温或4℃固定10 min-2 h,视切片厚度而定,用缓冲液漂洗后即可用于染色。

3)细胞固定:室温或4℃固定10-30 min,用缓冲液漂洗后即可用于染色。

2.原位杂交

注意:实验过程要保证操作不受环境RNase影响,可用我司的RNase remover(固相RNse酶清除剂,货号:10609ES60)喷洒工作台,杂交炉等准备洁净环境;实验操作中使用RNase-free的枪头,离心管,盖玻片,以及RNase-freePBS或者SSC清洗液。

1)组织固定:4℃浸泡固定2-24 h(边摇晃),用RNase-free缓冲液(如DEPC-treated PBS)漂洗后即可用石蜡包埋用于组织切片;或者固定好的组织浸泡在30%蔗糖(溶于RNase-free PBS4℃过夜,摇晃,使其沉浸在液面之下,即可用OCT包埋剂包埋用于组织切片;

2)切片固定:

A、用预冷的4%PFA于室温固定10 min-20 min,视切片厚度而定;

B、用RNase-free缓冲液(如DEPC-treated PBS)漂洗3次,每次5 min

C、用蛋白酶K1 μg/mL in 50 mM Tris pH 8, 5 mM EDTA)低速摇晃,室温处理5-45 min

D、用预冷的4%PFA于室温固定5-10 min,视切片厚度而定,用RNase-free缓冲液(如DEPC-treated PBS)漂洗3次,每次5min

E、在磁力搅拌器上准备一水盘,加入300 mL DEPC处理水和3.5 mL三乙醇胺(缓慢加入);

F、将固定后的切片放入上述水盘中,并在切片上方滴750 μL无水醋酸,边搅拌边孵育10 min

G、用DEPC处理的PBS清洗3次,5 min/次;之后进入后续的杂交实验。

注意事项

1)甲醛溶液有毒,请注意防护。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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