M-MuLV反转录试剂盒
产品名称： M-MuLV反转录试剂盒
英文名称： M-MuLV反转录试剂盒
产品编号： XY05004N
产品价格： 0
产品产地： 中国/上海
品牌商标： XY-Bioscience
更新时间： 2023-08-17T09:55:27
使用范围： null
上海信裕生物科技有限公司
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M-MuLV反转录试剂盒
产品说明
本公司生产的莫洛尼氏鼠白血病病毒（M-MuLV）逆转录酶是一种RNA介导的DNA聚合酶。该酶能以RNA（合成cDNA时）或单链DNA做模板，由引物起始合成一条互补的DNA。本试剂盒含有1st Strand cDNA合成所需的全部试剂。合成的1st Strand cDNA可广泛用于2nd Strand合成、杂交、PCR扩增、Real Time PCR反应等。
本产品含有1st Strand cDNA合成所需的全部试剂，可用于如下方面：
⑴1st-Stand cDNA的合成；
⑵cDNA Probe的制备；
⑶RT-PCR反应以及Real Time RT-PCR反应。
⑴1st-Stand cDNA的合成；
⑵cDNA Probe的制备；
⑶RT-PCR反应以及Real Time RT-PCR反应。
M-MuLV 逆转录酶（100 U/μl） 200 μl
5× M-MuLV 逆转录酶buffer 1 ml
Oligo（dT）18 Primer（50 μM） 200 μl
dNTP Mixture（各10 mM） 200 μl
RNase Inhibitor（40 U/μl） 200 μl
DEPC-H2O 1 ml×4
5× M-MuLV 逆转录酶buffer 1 ml
Oligo（dT）18 Primer（50 μM） 200 μl
dNTP Mixture（各10 mM） 200 μl
RNase Inhibitor（40 U/μl） 200 μl
DEPC-H2O 1 ml×4
保存温度：-20 ℃（避免反复冻融）
有效日期：12个月
有效日期：12个月
建立20 μl 的反应体系可以用于逆转录500 ng～5 μg总RNA或1 ng～500 ng mRNA。
1． 将以下组分加入无核酸酶的微量离心管中：
2 轻柔混匀。65 ℃加热5分钟后迅速置于冰上冷却。短暂离心后加入以下组分：
3 缓慢混匀。37 ℃反应60分钟。
4 在70 ℃加热15分钟使逆转录酶失活以终止反应。
5 cDNA产物可以直接作为PCR的模板。如果扩增的PCR产物大于1 kb，则需要去除与cDNA互补的RNA。可以使用1 μl的E.coli RNase H在37 ℃孵育20分钟以去除与cDNA互补的RNA
1． 将以下组分加入无核酸酶的微量离心管中：
| Oligo(dT)18 Primer | 1 μl |
| 模板RNA | 适量 |
| dNTP Mixture | 1 μl |
| DEPC-H2O | Up to 10 μl |
2 轻柔混匀。65 ℃加热5分钟后迅速置于冰上冷却。短暂离心后加入以下组分：
| 5× M-MuLV 逆转录酶buffer | 4 μl |
| M-MuLV 逆转录酶 | 1 μl |
| RNase Inhibitor | 1 μl |
| DEPC-H2O | Up to 20 μl |
3 缓慢混匀。37 ℃反应60分钟。
4 在70 ℃加热15分钟使逆转录酶失活以终止反应。
5 cDNA产物可以直接作为PCR的模板。如果扩增的PCR产物大于1 kb，则需要去除与cDNA互补的RNA。可以使用1 μl的E.coli RNase H在37 ℃孵育20分钟以去除与cDNA互补的RNA