Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina® “一步法”DNA建库试剂盒12203ES-文库及构建-试剂-生物在线
Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina® “一步法”DNA建库试剂盒12203ES

Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina® “一步法”DNA建库试剂盒12203ES

商家询价

产品名称: Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina® “一步法”DNA建库试剂盒12203ES

英文名称: Hieff  NGSTM OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina

产品编号: 12203ES08

产品价格: 0

产品产地: Yeasen

品牌商标: Yeasen

更新时间: 2023-08-17T13:40:59

使用范围: null

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Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina®

“一步法”DNA建库试剂盒

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina®

“一步法”DNA建库试剂盒

12203ES08

8 T

3683.00

12203ES24

24 T

7583.00

12203ES96

96 T

28663.00

产品描述

Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina®是针对Illumina®高通量测序平台专业开发设计的新一代酶切法建库试剂盒。与传统的建库法比较,本品采用高质量的片段化酶,摆脱了繁琐的超声过程,同时简化了操作流程,将片段化模块与末端修复模块合二为一,极大的降低了建库的时间和成本。本试剂盒具有优秀的文库转化率,可应用于常规动植物基因组、微生物基因组等样本,同时能兼容FFPE DNA样本的建库。经测序验证,不同GC含量的样本,均可获得优异的测序结果,文库覆盖度高,均一性好,偏好性低,使建库变得更加简单高效

Ø 适用500 pg-1 μg的基因组DNA、全长cDNA等样本

Ø 高质量片段化酶,可随机切割双链DNA,酶切片段无偏好性

Ø 片段化、末端修复/A一步完成

Ø 强扩增效率的高保真酶,显著提高文库质量及产量

Ø 适用于FFPE DNA样本

Ø 严格的批次性能与稳定性质控

产品组分

组分编号与名称

12203ES08

12203ES24

12203ES96

12203-A

 

Smearase® Mix

80 μL

240 μL

960 μL

12203-B

 

Ligation Enhancer

240 μL

720 μL

4×720 μL

12203-C

 

Fast T4 DNA Ligase

40 μL

120 μL

480 μL

12203-D

 

2×Super Canace®Ⅱ High-Fidelity Mix

200 μL

600 μL

4×600 μL

12203-E

 

Primer Mix

40 μL

120 μL

480 μL

运输与保存方法

冰袋运输。所有组分-20°C保存,有效期1年。

注意事项

一、关于操作

1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 请于使用前将试剂盒各组分置于室温解冻。解冻后上下颠倒数次充分混匀,短暂离心后置于冰上待用。

3. 配制各步骤反应液时推荐使用移液器吹打混匀或轻轻振荡,剧烈振荡可能会造成文库产出下降。

4. 为避免样品交叉污染,推荐使用带滤芯的枪头,吸取不同样品时请更换枪头。

5. 推荐在带热盖的PCR仪中进行各步骤反应,使用前应预热PCR仪至反应温度附近。

6. PCR产物因操作不当极容易产生气溶胶污染,进而影响实验结果准确性。推荐将PCR反应体系配制区和PCR产物纯化检测区进行强制性的物理隔离;使用专用的移液器等设备;并定时对各实验区域进行清洁(使用0.5%次**钠或10%漂白剂进行擦拭清理),以保证实验环境的洁净度。

二、关于DNA片段化

1. 本试剂盒兼容范围为500 pg – 1 μg Input DNA。应尽可能使用A260/A280 = 1.8-2.0的高质量Input DNA

2. Input DNA引入高浓度金属离子螯合剂或其他盐,可能会影响后续实验,建议将DNA稀释在ddH2O或不含EDTA10 mM Tris Buffer (pH 7.5-8.0)中进行片段化。

3. 对于常规的高质量基因组DNA,酶切时间参考表5,本试剂盒片段化偏好低,耐受各种GC含量的模板。对于不同降解程度的FFPE样本,酶切时间参考表6。以上为推荐时间,需客户在自己的实验体系中进行微调,以达到最佳效果。

4.为保证优质精确的片段化效果,片段化反应配制过程请于冰上操作。

5. 针对FFPE DNA建库,若样本质量不佳,客户对当前建库产量不满意,可选购我公司的FFPE DNA Repair Reagent (Cat#12606)FFPE DNA进行修复,具体使用方法可参考此产品说明书。该试剂可与片段化末修加A过程同时进行,无需额外的操作。

三、关于接头连接(Adapter Ligation

1. 针对Illumina®测序平台,Yeasen提供48Barcoded Adapters: Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 1~Set 4Cat#12615~Cat#12618);单端 96Index Primers: Hieff NGS® 96 Single Index Primers Kit for Illumina® , Set 1~Set 2 Cat#12611~Cat#12612);双端 384 Index Primers: Hieff NGS® 384 Dual Index Primers Kit for Illumina® , Set 1~Set 2 Cat#12613~Cat#12614

2. Adapter的质量和使用浓度直接影响连接效率及文库产量。Adapter用量过高可能会产生较多Adapter Dimer;用量较低可能会影响连接效率及文库产量。表1列举了使用本试剂盒,不同Input DNA量推荐的Adapter使用量。

1  500 pg-1 μg Input DNA推荐的Adapter使用浓度

Input DNA

Adapter : Input DNA摩尔比

Input DNA

Adapter : Input DNA摩尔比

1 μg

10:1

50 ng

100:1

500 ng

20:1<