ATP含量检测试剂盒 紫外分光光度法北京索莱宝科技有限公司--实验室产品

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性能参数

产品名称: ATP含量检测试剂盒 紫外分光光度法
英文名称: ATP Content Assay Kit
产品货号: BC0300
产品规格: 50管/48样
产品产地: 北京
产品商标: solarbio
价    格: 960元
保存与运输: 2-8℃长期保存
现货状态: 现货
产品资料: 资料下载
更新时间: 2019/5/22 14:52:00
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诚信指数:569点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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北京索莱宝科技有限公司--实验室产品
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北京市通州区马驹桥联东U谷景盛南四街85A三层
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北京·北京
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产品详细描述

 

产品名称:ATP含量检测试剂盒

产品英文名ATP Content Assay Kit

产品货号:BC0300            产地:北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼

产品规格:100管/48样                      产品商标:solarbio
保存与运输:4℃保存或-20℃保存;            参考价格:1400
库存状态:现货                          
关键字:ATP含量检测试剂盒|ATP检测试剂盒|试剂盒|

简要介绍:
ATP 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是生物能量通货,能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。
    测定ATP 含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。肌酸激酶催化肌酸和ATP 反应生成***酸肌酸,可在700nm 下用***钼酸比色法检测***酸肌酸含量,以此反应ATP 含量。


产品详细描述
产品内容:

  组分 规格 保存
试剂一 底物液Ⅰ 粉剂×1      室温保存
底物液Ⅰ配制:用时加10mL煮沸双蒸水溶解,并沸水浴使溶解完全;临用前观察如有结晶,可沸水浴溶解后置于37保存待测。
试剂二 底物液Ⅱ 20mL×1 4℃保存
试剂三 促进剂 粉剂×2  -20℃保存
稀释液760μL×2 4℃保存
试剂三应用液(促进剂)配制:临用前取1支试剂三稀释液加入1支试剂三粉剂中,充分溶解备用。
试剂四 沉淀剂 液体5.5 mL×1 4℃保存
试剂五 显色剂 甲液7 mL×4 4℃保存
乙液6mL×4 4℃保存
显色应用液的配制:用时取一瓶显色剂甲液加入一瓶显色剂乙液中,充分混匀4待用,现用现配。
试剂六 终止剂 50 mL×1 室温保存
试剂七 ATP标准品 粉剂×2  4℃保存
5mmol/L ATP标准品贮备液配制:用时加双蒸水定容至1mL,制备5mmol/L ATP标准品贮备液。
1mmol/L ATP标准品应用液配制:将标准品贮备液与双蒸水1:4稀释,即5倍稀释。

产品说明:
     三***酸腺苷(adenosine 5-triphosphateATP)是生物体内能量转换最基本的载体, 其含量的变化直接关系到各器官的能量代谢。ATP作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP水平的改变,会影响许多细胞的功能。通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下,ATP水平会下降,而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降,在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生状态。ATP含量测定试剂盒可以用于检测红细胞或组织内的ATP水平。
自备仪器和用品:
分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、台式离心机、研钵和蒸馏水。
操作步骤:

  • 样本前处理
  1. 红细胞抗凝全血取下层积压红细胞,一般按1:4的体积比加双蒸水进行稀释,再混匀使溶血完全,制备成溶血液。将制好的溶血液加入玻璃试管中沸水加热煮10分钟,取出混匀抽提1分钟,4000/分钟,离心10分钟,取上清液待测
  2. 组织样本准确称取组织重,按质量g):体积(mL)19的比例加入9倍体积的沸双蒸水,制成10%的匀浆液,再置于沸水中煮10min,取出混匀抽提1min3500/分钟,离心10min,取上清液待测
  3. 培养细胞:先离心处理将细胞和培养上清分离,弃上清,得到下层沉淀细胞(一般细胞数量达到106 ),将收集好的细胞加入300-500μL的热双蒸水,置于热水浴(90-100)中匀浆破碎后,将细胞悬液于沸水浴中加热10min,取出混匀抽提1min(涡旋混匀),即可用于测定。(如果存在大块细胞碎片,需离心后取上清测定)

二、操作步骤

试剂名称(μL) 测定管 对照管 标准管 空白管
样本 30 30    
1mmol/L标准液     30 30
试剂一 100 100 100 100
试剂二 200 200 200 200
试剂三 30   30  
蒸馏水   30   30
充分混匀,37℃水浴30min
试剂四 50 50 50 50
充分混匀,4000rpm离心5min,取上清液300μL 测定
样本上清液 300 300 300 300
试剂五 500 500 500 500
混匀,室温静置2min
试剂六 500 500 500 500

混匀,室温静置5min,波长636nm,光径0.5cm,双蒸水调零,测定各管吸光值。
注意:在比色前比色皿用自来水洗10次,再用蒸馏水洗4-5次,以免***污染。
如果样本量大,建议将试剂混合后再按照该表操作
1混合试剂配制:
工作液A:按试剂一:试剂二:试剂三=100:200:30的比例配制,现用现配,按需配制。
工作液B:按试剂一:试剂二=100:200的比例配制,现用现配,按需配制。
2、试剂配好后按下表操作:

试剂名称(μL) 测定管 对照管 标准管 空白管
样本 30 30    
1mmol/L标准液     30 30
工作液A 330   330  
工作液B   300   300
蒸馏水   30   30
充分混匀,37℃水浴30min
试剂四 50 50 50 50
充分混匀,4000rpm离心5min,取上清液300μL 测定
样本上清液 300 300 300 300
试剂五 500 500 500 500
混匀,室温静置2min
试剂六 500 500 500 500

混匀,室温静置5min,波长636nm,光径0.5cm,双蒸水调零,测定各管吸光值。
注意:在比色前比色皿用自来水洗10次,再用蒸馏水洗4-5次,以免***污染。
ATP 含量计算:

  1. 红细胞ATP 含量计算

ATP 含量(μmol/gHb)=[ (A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白)] ×标准品浓度(1×103μmol/L×样本测定前稀释倍数÷血红蛋白浓度(gHb/L ) 

  1. 组织、细胞中ATP 含量计算
  2. ATP 含量(μmol/gprot)=[ (A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白)] ×标准品浓度(1×103μmol/L×样本测定前稀释倍数÷待测样本蛋白浓度(gprot/L ) 

注意:
1.要求不能有任何***污染,建议最好用一次性塑料试管。
2.显色应用液配好后,不可放置太久,一般可保存5天,最好现配现用。
3.组织匀浆宜用2%-5%浓度的匀浆上清,若样本浓度过高,则底色过深(对照管OD过高),需稀释测定,一般通过预实验将对照OD值控制在1.0以下。

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