NIT-1/小鼠胰岛素瘤β细胞武汉益普生物科技有限公司

银牌供应商

性能参数

产品名称: NIT-1/小鼠胰岛素瘤β细胞
英文名称: NIT-1
产品货号: YCL-0562
产品规格: 1×10^6cells/T25培养瓶
试剂级别: 细胞培养级
产品产地: 武汉
产品商标: 益普生物
价    格: 询价
保存与运输: 复苏细胞常温运输,冻存细胞干冰运输
现货状态: 充足
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2019/7/14 16:51:00
浏览人数:112
诚信指数:55点
了解更多:进入公司展台
使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
点此求购
在线QQ: 我是344115770,请问我有什么可以帮到您呢?
生物在线声明:以上所展示的信息由企业自行提供,内容的真实性、准确性和合法性由发布企业负责。生物在线对此不承担任何保证责任。

供应商联系卡

武汉益普生物科技有限公司
地址:
武汉市洪山区狮子山街特一号华中农业大学天惠生物科技孵化器天惠楼221、223室
邮编:
430075
电话:
13657268723
传真:
027-87638958
联系人:
田凯
所在区域:
湖北·武汉
邮件:
公司展台:
在线QQ:
我是344115770,请问我有什么可以帮到您呢?
扫一扫,关注我们

产品详细描述

NIT-1
产品货号:YCL-0562
细胞简称:NIT-1
中文名称:小鼠胰岛素瘤β细胞
培养条件:F-12K+10% heat-inactivated dialyzed FBS+1% P/S
细胞形态:
规格:1×10^6cells/T25培养瓶

质控与售后:

<1>细胞在发货前进行质检: 1、细胞存种的活性检测。 2、细菌、真菌、霉菌污染物镜检。 3、衣原体、支原体检测。 <2>产品质量保证及售后: 1、运输过程中细胞出现污染和状态不好,免费重新发货。细胞经鉴定与承诺不符,无条件退款。 2、 实验过程中若确定是客户本身问题,需支付物流和耗材费用,重新发货。其他根据情况灵活处理。 3、 客户实验过程中,可提供相应技术指导。

细胞培养操作指南 Operating Instruction of Cell Culture
收到常温细胞后如何处理?

1. 首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。

2. 用 75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养 2-4 小时,以便稳定细胞状态。

3. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。

4. 静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。

5. 贴壁细胞:若细胞生长密度超过 80% ,可正常传代;若未超过 80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留 5ml 左右继续培养,直至细胞密度达 80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。

6. 悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至 50ml 无菌离心管内,1200rpm 离心 5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml 培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过 80%,可将细胞悬液分至 2 个细胞培养瓶内培养,补加培养基至 5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达 80%左右时再进行传代操作。

 

温馨提醒

1. 可将培养瓶内多余的培养基转移至 50ml 无菌离心管中,备用;细胞首次传代时,可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用, 让细胞逐渐适应培养条件。

2. 确认细胞状态良好后,应及时将部分细胞冻存,再进行后续的实验,避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失,影响后续实验。

3. 建议客户收到细胞后前 3 天,100X、200X、400X 各拍 3 张细胞照片,记录细胞状态,便于后续和技术支持沟通交流。


贴壁细胞传代

1. 从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃;

2. 用不含钙、镁的平衡盐溶液冲洗细胞(每 10cm2 培养表面积约 2mL 溶液);从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液,以避免搅动细胞层,前后摇晃?器数次(注:冲洗步骤可去除可能抑制解离剂作用的少量血清、钙和镁);

3. 从培养容器中吸出冲洗液并丢弃,向培养瓶中加入预热的解离剂;试剂量应足以覆盖细胞层(每 10cm大约 0.5mL);

4. 轻轻摇晃容器,使试剂完全覆盖细胞层;吸出多余解离试剂,T25 细胞培养瓶留 200ul 左右即可;

5. 将培养容器在??下孵育约 2 分钟(请注意实际孵育时间根据所用细胞系不同而有所差异);

6. 在显微镜下观察细胞解离情况;如果解离程度未达 90%,可将孵育时间延长几分钟,每 30 秒钟检查一次解离情况;也可轻轻拍打培养容器以加快细胞解离;

7. 细胞解离程度大于等于 90%时,倾斜培养容器,使细胞上液体尽快流尽;加入所用解离剂两倍体积的预热完全生长培养基;吹打细胞层表面数次,使培养基分散;

8. 将细胞转移到 15mL 无菌离心管中,以 200×g 的离心力离心 3-5 分钟(请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异);

9. 用最少体积的预热完全生长培养基重新悬浮细胞沉淀,将细胞悬液按照推荐比例稀释,并将适量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中,把细胞放回培养箱(注:如果使用培养瓶,将其放入培养箱前应将瓶盖旋松,以便进行充分的气体交换,除非您使用的是通气式培养瓶和透气性瓶盖)。


悬浮细胞传代

方法一:

1. 当细胞适合传代(即:处于对数生长期而未达到汇合状态)时,从培养箱中取出培养瓶,使用无菌吸管从培养瓶中取出少量细胞样品;如果吸取样品前细胞已经沉淀,应转动培养瓶,使细胞在培养基中均匀分布;

2. 通过此样品,采用血球计数器或细胞计数仪测定总细胞数;计算将细胞稀释到推荐接种密度时需要加入的培养基积?

3. 在无菌状态下将适量预热的生长培养基加入到培养瓶中;必要时可将培养的细胞分到多个培养瓶中;

4. 将培养瓶的瓶盖拧松一圈,以便进行充分的气体交换(或者使用透气性瓶盖),并将培养瓶恒温培养箱中静置培养(注:为了尽量减少细胞碎片和无用的代谢副产物在培养体系中蓄积,每周应将细胞悬液至少离心一次,离心力为 200×g,时间为 3-5 分钟,然后用新鲜的生长培养基重新悬浮细胞沉淀)。

方法二:

1. 将细胞悬液转移到 15mL 无菌离心管中,以 200×g 离心力离心 3-5 分钟(请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异)?

2. 用最少体积的预热完全生长培养基重新悬浮细胞沉淀,将细胞悬液按照推荐比例稀释,并将适量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中;

3. 将培养瓶的瓶盖拧松一圈,以便进行充分的气体交换(或者使用透气性瓶盖),并将培养瓶恒温培养箱中静置培养。


细胞冻存

1. 配制冻存培养基,于 2℃-8℃下储存?直至使用;注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系;

2. 冻存贴壁细胞时,利用传代(详细步骤参考细胞传代)时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来;用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞;根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量;

3. 以约 200×g 的离心力将细胞悬液离心 3-5 分钟;在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀;

4. 用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度;

5. 将细胞悬液分装到若干冻存管中;分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态;

6. 使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低1℃;或将装有细胞的冻存管放入 Nalgene 细胞冻存盒中,然后将冻存盒置于80℃条件下过夜;

7. 将已经冷冻的细胞转移到液氮罐中储存。

8. 没有上述条件的实验室,亦可按下列顺序依次降温:室温→4℃ 30min→-20℃ 30-60min→-80℃过夜→液氮保存。


细胞复苏

1. 将装有冻存细胞的冻存管从液氮罐中取出,立即放入 37℃水浴中;

2. 在 37℃水浴中轻轻转动冻存管,直到冻存管内仅剩余一小块冰芯,使细胞迅速解冻(1 分钟内);

3. 将冻存管转移到超净工作台内;打开盖子前,用 75%酒精擦拭冻存管外部;

4. 将解冻的细胞逐滴转移到装有适量经过预热、适合该细胞系的完全生长培养基的离心管内;

5. 以大约 200×g 的离心力将细胞悬?离心 3-5 分钟;实际离心速度和时间取决于细胞种类;

6. 离心后,检查上清液是否清澈,有无完整的细胞沉淀;在无菌条件下,小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀;

7. 轻轻将细胞重新悬浮在完全生长培养基中,然后转移到合适的培养容器和推荐的培养环境中(注:培养瓶尺寸取决于冻存管冻存的细胞数量, 培养环境取决于细胞和培养基类型)。



生物在线声明:以上所展示的信息由企业自行提供,内容的真实性、准确性和合法性由发布企业负责。生物在线对此不承担任何保证责任。

查看 NIT-1/小鼠胰岛素瘤β细胞 产品的用户还对以下产品感兴趣

  EMT6 [EMT-6]/小鼠乳腺癌细胞  [供应商:武汉益普生物科技有限公司]
  MV-4-11/人髓性单核细胞白血病细胞(通过STR鉴定)  [供应商:武汉益普生物科技有限公司]
  NCI-H2228 [H2228; H-2228]/人肺癌细胞(通过STR鉴定)  [供应商:武汉益普生物科技有限公司]
  Renca [RenCa]/小鼠肾癌细胞  [供应商:武汉益普生物科技有限公司]
  TtT/GF/小鼠垂体促甲状腺滤泡星状细胞  [供应商:武汉益普生物科技有限公司]
  MLO-Y4 [MLOY4]/小鼠骨样细胞  [供应商:武汉益普生物科技有限公司]
  MARC-145 [Marc-145; Marc 145; Marc145]/非洲绿猴胚胎肾细胞  [供应商:武汉益普生物科技有限公司]
  HULEC-5a/人肺微血管内皮细胞(通过STR鉴定)  [供应商:武汉益普生物科技有限公司]
  RPMI 8226/人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞(通过STR鉴定)  [供应商:武汉益普生物科技有限公司]
  NIT-1/小鼠胰岛素瘤β细胞  [供应商:武汉益普生物科技有限公司]

ADVERTISEMENT

找不到您所需的产品,发布求购试试?

标题:*
描述:
姓名:*
Email:*
单位:*
电话:*
地址:*
邮编:
资料: 需要 不需要
报价: 需要 不需要