乙醛脱氢酶(ALDH)活性检测试剂盒 
品牌：Solarbio | 货号：BC0750

产品内容：
提取液：液体50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体15mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体5mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体3mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂四：液体2mL×1 支，4℃保存。
试剂五：液体2mL×1 支，4℃保存。


产品说明：
       乙醛脱氢酶 (EC 1.2.1.10)是醛脱氢酶的一种，广泛存在于各种动物、植物和微生物体内。主要作用是将乙醛氧化成乙酸，在酒精代谢中起主要作用。在人类和许多动物体内，线粒体乙醛脱氢酶能把对生物体有害的醇类转化，所以在细胞解毒研究中乙醛脱氢酶受到高度关注；同时，乙醛脱氢酶在分子生物学以及相关疾病的检测方面有较广泛的研究应用。
      在辅酶Ⅰ存在的条件下，乙醛脱氢酶催化乙醛和NAD+转化为乙酸和NADH，在340nm 处的吸光值会增加，测定340nm 处的吸光值变化，可计算得到乙醛脱氢酶的活性。

所需仪器和试剂：
天平、离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度、1mL 石英比色皿、蒸馏水。

操作步骤：
ALDH 提取：
1. 组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为 1：5-10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆。12000rpm， 4℃离心 20 分钟。
2. 细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为 500-1000:1 的比例（建议 500 万细胞加入1mL 提取液），冰浴超声波破碎细菌或细胞（功率 30%或 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒。总时间3min）；10000rpm, 4℃离心 10 分钟，取上清，置冰上待测。 

测定操作表:

充分混匀，1mL 石英比色皿，对照管调零，于340nm 处测定吸光值A1，迅速置于37℃水浴1min， 于340nm 处测定吸光值A2，△A= A1-A2。
 
 
ALDH 酶活计算:
（1） 按蛋白浓度计算
酶活定义：每毫克蛋白每分钟催化还原1μmol NAD+的酶量为 1U。
ALDH 酶活（U/mg prot）=△A/(e× d) ×V反总÷（V样×Cpr）÷T=0.804×△A÷Cpr
（2） 按样本质量计算
酶活定义：每克蛋白每分钟催化还原1μmol NAD+的酶量为 1U。
ALDH 酶活（U/g）=△A/(e× d) ×V反总÷（V样×W÷V样总）÷T=0.804×△A÷W
（3） 按照细胞数量计算
酶活定义：每104个细胞每分钟催化还原1μmol NAD+的酶量为 1U。
ALDH 酶活（U/104cell）=△A/(e× d) ×V反总÷（V样÷V样总×细胞数量（万个））÷T=0.804×△A÷细胞数量（万个）
e ：NADH 微摩尔消光系数，6.22×10-3 L/μmol /cm；d：比色皿光径，1cm；V 反总：反应体系总体积，1mL；V 样：反应体系中样本体积，0.2mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；T：反应时间：1min。

相关文献：
《Untangling the response of bone tumor cells and bone forming cells to matrix stiffness and adhesion ligand density by means of hydrogels》 作者:Tongmeng Jiang,Jinmin Zhao,Shan Yud,Zhengwei Mao,Changyou Gao,Ye Zhu,Chuanbin Mao,Li Zheng 期刊:Biomaterials 影响因子:10.273 PMID:30343256
《Efficient metabolic evolution of engineered Yarrowia lipolytica for succinic acid production using a glucose-based medium in an in situ fibrous bioreactor under low-pH condition》 作者:Chong Li, Shi Gao, Xiaotong Li, Xiaofeng Yang & Carol Sze Ki Lin  期刊:Biotechnology for Biofuels 影响因子:5.452 PMID: