内毒素清除剂北京索莱宝科技有限公司

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性能参数

产品名称: 内毒素清除剂
英文名称: Endotoxin Erasol(for DNA solution)
产品货号: E1040
产品规格: 100ml
产品产地: 北京
产品商标: Solarbio
价    格: 400元
保存与运输: 4℃半年有效,-20℃长期储存
现货状态: 现货
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2019/7/4 13:13:00
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产品详细描述

内毒素清除剂


货号:E1040

规格:20ml/ 100ml

保存:4℃半年有效,-20℃长期储存。

产品简介: 本公司生产的内毒素清除剂主要用于清除 DNA、蛋白质或其他液体样品中的内毒素。在特定的 pH 值、 盐浓度和温度条件下,内毒素清除剂能与 DNA、重组蛋白以及液体样品中的内毒素特异性结合,经过室温高 速离心后,DNA 或蛋白质等保留在水相,而内毒素则被浓缩到极小体积的下层相而被清除。经过 3 次以上重 复抽提后可将活性为 5000~50000 EU/ml 的内毒素水平降低到 5~0.5 EU/ml 以下,即降低 1000~10000 倍。

操作步骤: 提取前请将内毒素清除剂放在冰上冰浴 5min,期间翻转瓶子数次使试剂均匀预冷。

1、a)已纯化的质粒 DNA 内毒素清除:吸取 500μl DNA 溶液于微型离心管,加入 1/10 体积 3M NaAc pH5.2 或 1/20 体积 5M NaCl 溶液,冰浴 5min。 b)在提取质粒 DNA 过程中清除内毒素:以碱裂解法提取质粒为例,在加入裂解液和中和液并离心去除 碎片之后,吸取含质粒 DNA 的上清于新离心管中,冰浴 5min。

2、加入 1/5 体积预冷的内毒素清除剂,振荡混匀,溶液变浑浊。

3、冰浴 5min,溶液应变清亮。

4、37℃水浴 5min,不时振荡,溶液又变浑浊。

5、12000rpm 室温离心 5min,溶液应分为两相,上层水相含 DNA,下层油状相含内毒素。

6、将含 DNA 的上层水相转移到新管,弃油状相,重复抽提三次,即重复步骤 2-6 三次。

7、加入 2.5 体积无水乙醇,-20℃沉淀 30min 或过夜;12000rpm 离心 10min,弃上清;加入 70%乙醇洗 涤沉淀,12000rpm 离心 5min 弃上清;空气干燥沉淀,加入 100~200μl 无内毒素的高纯水或 TE 溶解沉淀。

8、用内毒素检测试剂测定样品中内毒素活性,并与初始样品比较。

注意事项:

1、DNA 浓度>1mg/ml 时清除内毒素效率降低。由于 DNA 和蛋白质本身的性质,清除程序可导致 10-20 %的 DNA 丢失,所幸的是与清除内毒素的艰难相比 DNA 更容易提取制备。

2、所有溶液应用无内毒素的高纯水配制,所有器械材料均应不含内毒素,玻璃器皿可高温烘烤,非挥发 性水溶液可高压 120℃高温处理。

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