MDA含量检测试剂盒北京索莱宝科技有限公司

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性能参数

产品名称: MDA含量检测试剂盒
英文名称: Micro Malondialdehyde (MDA) Assay Kit
产品货号: BC0025
产品规格: 100管/96样
产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三
产品商标: Solarbio
价    格: 580元
保存与运输: 4℃保存或-20℃保存;
现货状态: 现货
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2019/12/20 11:10:00
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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北京索莱宝科技有限公司
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北京市通州区马驹桥镇联东U谷景盛南四街15号85A三层
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产品详细描述

文献引用  

《Protective effect of agmatine against hyperoxia-induced acute lung injury via regulating lncRNA gadd7》 作者:Guoyue Liu,Hong Mei,Miao Chen,Song Qin,Kang Li,Wei Zhang,Tao Chen 期刊:Biochemical and Biophysical Research Communications 影响因子:2.705 PMID:31196629
《Inhibiting the CD38/cADPR pathway protected rats against sepsis associated brain injury》 作者:Qian-Yi Peng,Yi-Min Wang,Cai-Xia Chen,Yu Zou,Li-Na Zhang,Song-Yun Deng,Yu-Hang Ai 期刊:Brain Research 影响因子:2.929 PMID:29030054
《Effects of Quercetin on Proliferation and H2O2-Induced Apoptosis of Intestinal Porcine Enterocyte Cells》 作者:Zhigang Chen , Qiaoling Yuan , Guangren Xu , Huiyu Chen , Hongyu Lei  and Jianming Su 期刊:Molecules 影响因子:3.06 PMID:
《Hydrogen-water ameliorates radiation-induced gastrointestinal toxicity via MyD88’s effects on the gut microbiota》 作者:Hui-wen Xiao, Yuan Li, Dan Luo, Jia-li Dong, Li-xin Zhou, Shu-yi Zhao, Qi-sheng Zheng, Hai-chao Wang, Ming Cui & Sai-jun Fan 期刊:experimental and molecular medicine 影响因子:4.743 PMID:29371696
《Antioxidant activity of whole grain Qingke (Tibetan Hordeum vulgare L.) toward oxidative stress in d-galactose induced mouse model》 作者:Xuejuan Xia,Yuxiao,Xing,Guannan Li,Jinsong Wu,Jianquan Kan 期刊:Journal of Functional Foods 影响因子:3.197 PMID:
《Toxic effect of microcystin-LR on blood vessel development》 作者:Qilong Wang, Guosheng Xiao, Guoliang Chen, Huihui Du, Linping Wang,Dongqin Guo & Tingzhang Hu 期刊:Toxicological & Environmental Chemistry 影响因子:3.547 PMID:28189720
《A C2H2 zinc-finger protein OsZFP213 interacts with OsMAPK3 to enhance salt tolerance in rice》 作者:Zeyong Zhang,Huanhuan Liu,Ce Sun,Qibin Ma,Huaiyu Bu,Kang Chong,Yunyuan Xu 期刊:Journal of Plant Physiology 影响因子:2.825 PMID:30055519
《Physiological and transcriptomic analysis revealed the involvement of crucial factors in heat stress response of Rhododendron hainanense》 作者:Ying Zhao,Wengang Yu,Xiangyu Hu,Youhai Shi,Yu Liu,Yunfang Zhong,Peng Wang,Shuya Deng,Jun Niu,Xudong Yu 期刊:Gene 影响因子:2.638 PMID:29604462
《Identification, Expression, and Functional Analysis of the Group IId WRKY Subfamily in Upland Cotton (Gossypium hirsutum L.)》 作者:Lijiao Gu1, Hantao Wang, Hengling Wei, Huiru Sun, Libei Li, Pengyun Chen, Mohammed Elasad, Zhengzheng Su, Chi Zhang, Liang Ma, Congcong Wang and Shuxun Yu 期刊:Frontier in Immunology 影响因子:4.259 PMID:
《Environmental stress stability of pectin-stabilized resveratrol liposomes with different degree of esterification》 作者:Ping Shao,Pei Wang,Ben Niu,Ji Kang 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影响因子:4.784 PMID:30036624
《Protective effect of dexmedetomidine against diabetic hyperglycemia-exacerbated cerebral ischemia/reperfusion injury: An in vivo and in vitro study》 作者:Lingyang Chen,Jianbin Cao,Donghang Cao,Mingcang Wang,Haifei Xiang,Yanqing Yang,Tingting Ying,Haitao Cong 期刊:Life Sci. 影响因子:3.448 PMID:31185237
《Characterization of two copper/zinc superoxide dismutases (Cu/Zn-SODs) from the desert beetle Microdera punctipennis and their activities in protecting E. coli cells against cold》 作者:Zilajiguli Xikeranmu,Maimaitiaili Abdunasir,Ji Ma,Kuerban Tusong,XiaoningLiu 期刊:Cryobiology 影响因子:2.141 PMID:30890324

测定意义:氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质;后者逐渐分解为一系列复杂的化合物,其中包括MDA。通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平。

测定原理:MDA与硫代***酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生成红色产物,在532nm有最大吸收峰,进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量;同时测定600nm下的吸光度,利用532nm与600nm下的吸光度的差值计算MDA的含量。

需要的仪器,耗材:可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

产品内容:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 30mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×2 瓶,4℃保存;

MDA 检测工作液的配制:用时在瓶试剂二中加入 15mL 试剂一,溶解混匀,4℃保存待用。

试剂三:液体 10mL×1 瓶,4℃保存;

注意事项:MDA 检测工作液较难溶解,可以 70℃加热,并剧烈振荡以促进溶解。或者通过超声处 理以促进溶解。

MDA 提取:

1、细菌或细胞样品的制备:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照 400 万细菌或细 胞加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率 20%,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃ 离心 10min,取上清,置冰上待测。

2. 组织样品的制备:称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆;8000g 4℃离心 10min,取 上清,置冰上待测。

3. 血清(浆):直接检测。

测定步骤:

1、可见分光光度计/酶标仪预热 30min 以上,蒸馏水调零。

2、按下表步骤加样:

试剂名称                              测定管                 空白管
MDA 检测工作液(µL)         300                     300
蒸馏水(µL)                           -                        100
样本(µL)                             100                        -  
试剂三(µL)                          100                     100

混合液在 100℃水浴中保温 60min 后(盖紧,防止水分散失),置于冰浴中冷却,10000g,常温, 离心 10min。吸取 200µL 上清液于微玻璃比色皿或 96 孔板中,测定各样品在 450nm、532nm 和 600nm 处的吸光度。分别计算∆A450=A450 测定-A450 空白,∆A532=A532 测定-A532 空白,∆A600=A600 测 定-A600 空白。空白管只需做 1-2 次。

三、MDA 含计算:

a.按 96 孔板计算

1、细菌、细胞或动物组织中 MDA 含计算

(1)按照蛋白浓度计算 MDA 含(nmol/mg prot)=(12.9×(∆A532-∆A600)-2.58×∆A450)×V 总÷(Cpr×V 样本) =5×(12.9×(∆A532-∆A600)-2.58×∆A450)÷Cpr

(2)按照样品质计算 MDA 含(nmol/g 鲜重)=(12.9×(∆A532-∆A600)-2.58×∆A450)×V 总÷(W×V 样本÷V 提取) =5×(12.9×(∆A532 -∆A600)-2.58×∆A450)÷W

(3) 按照细菌或细胞密度计算: MDA 含(nmol/104 cell)=(12.9×(∆A532-∆A600)-2.58×∆A450)×V 总÷(400÷V 提取×V 样本) =0.125×(12.9×(∆A532-∆A600)-2.58×∆A450)

(4)按血清(浆)体积计算: MDA 含(nmol/mL)=(12.9×(∆A532-∆A600)-2.58×∆A450)×V 总÷V 样本 =5×(12.9×(∆A532 -∆A600)-2.58×∆A450)

V 总:反应体系总体积,0.5mL;V 样品:加入样品体积,0.1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL。 W:样品质,g;400:细胞或细菌总数,400 万;V 提取:提取液体积,1mL。

2、植物组织中 MDA 含计算

(1)按照样品质计算 MDA 含(nmol/g 鲜重)=(12.9×(∆A532-∆A600)-1.12×∆A450)×V 总÷(W×V 样本÷V 提取) =5×(12.9×(∆A532-∆A600)-1.12×∆A450)÷W

(2)按照蛋白浓度计算 MDA 含(nmol/mg prot)=(12.9×(∆A532-∆A600)-1.12×∆A450)×V 总÷(Cpr×V 样本) =5×(12.9×(∆A532-∆A600)-1.12×∆A450)÷Cpr

V 总:反应体系总体积,0.5mL;V 样品:加入样品体积,0.1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质,g;V 提取:提取液体积,1mL。

b.按微比色皿计算

1、细菌、细胞或动物组织中 MDA 含计算

(1)按照蛋白浓度计算 MDA 含(nmol/mg prot)=(6.45 ×(∆A532-∆A600)-1.29×∆A450)×V 总÷(Cpr×V 样本) =5×(6.45 ×(∆A532-∆A600)-1.29×∆A450)÷Cpr

(2)按照样品质计算 MDA 含(nmol/g 鲜重)=(6.45 ×(∆A532-∆A600)-1.29×∆A450)×V 总÷(W×V 样本÷V 提取) =5×(6.45 ×(∆A532-∆A600)-1.29×∆A450)÷W

(3) 按照细菌或细胞密度计算: MDA 含(nmol/104 cell)=(6.45 ×(∆A532-∆A600)-1.29×∆A450)×V 总÷(400×V 样本÷V 提取) =0.0125×(6.45 ×(∆A532-∆A600)-1.29×∆A450) (4)按血清(浆)体积计算: MDA 含(nmol/mL)=(6.45×(∆A532-∆A600)-1.29×∆A450)×V 总÷V 样本 =5×(6.45×(∆A532 -∆A600)-1.29×∆A450)

V 总:反应体系总体积,0.5mL;V 样品:加入样品体积,0.1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL; W:样品质,g;400:细胞或细菌总数,400 万;V 提取:提取液体积,1mL。

2、植物组织中 MDA 含计算

(1)按照样品质计算 MDA 含(nmol/g 鲜重)=(6.45 ×(∆A532-∆A600)-0.56×∆A450)×V 总÷(W×V 样本÷V 提取) =5×(6.45 ×(∆A532-∆A600)-0.56×∆A450)÷W

(2)按照蛋白浓度计算 MDA 含(nmol/mg prot)=(6.45 ×(∆A532-∆A600)-0.56×∆A450)×V 总÷(Cpr×V 样本) =5×(6.45 ×(∆A532-∆A600)-0.56×∆A450)÷Cpr

V 总:反应体系总体积,0.5mL;V 样品:加入样品体积,0.1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL; W:样品质,g;V 提取:提取液体积,1mL。


注意事项: 若发现检测样本吸光值过低,可以将沸水浴时间 60min 调整为 90min 或者更长,但同一实验中 的 MDA 的检测都需要延长到同一时间以免引起误差。

 

 

 

 

 

 

 

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